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P19CL6の分化について トピック削除
No.4137-TOPIC - 2007/05/01 (火) 15:29:10 - isson
P19CL6細胞を使って実験をしているのですが、1%DMSOによる心筋分化の系で、はじめの何回かはうまくいっていたのですが、ここ数ヶ月、分化をかけるとday6-8ぐらいで細胞が全て浮いてきてしまうという事態に陥っています。mediumは全て作り直したり細胞も新しいのを起こしたりしましたが、なぜか未分化では特に問題はなさそうなのですが、分化をかけると浮いてくるという状態が続いています。やり方ははじめと変えたつもりはないのですが。このような経験をお持ちの方、アドバイスをお願いいたします。
 
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RE P19CL6の分化について 削除/引用
No.4137-2 - 2007/06/16 (土) 05:05:02 - Shizuka
P19CL6を培養して3年になりますが、分化の途中ですべての細胞が浮いてくるというのは見たことがありません。ですが、分化をしなくなるというのはあります。原因はいくつかあります。例えば、細胞がコンフルエントになる前に継代をしなかった、DMSOが古い(においがきつくなります)、培地交換が適切な時間(通常1日置き(e.g. day 2, 4, 6...))に行われていない(実際、毎日培地を交換すると拍動する心筋に分化しませんでした。)などです。

メールの状況から考えるとDMSOの影響を受けているような気がします。新しいDMSOを購入して試してみてはどうでしょうか?

P19CL6の分化について 削除/引用
No.4137-1 - 2007/05/01 (火) 15:29:10 - isson
P19CL6細胞を使って実験をしているのですが、1%DMSOによる心筋分化の系で、はじめの何回かはうまくいっていたのですが、ここ数ヶ月、分化をかけるとday6-8ぐらいで細胞が全て浮いてきてしまうという事態に陥っています。mediumは全て作り直したり細胞も新しいのを起こしたりしましたが、なぜか未分化では特に問題はなさそうなのですが、分化をかけると浮いてくるという状態が続いています。やり方ははじめと変えたつもりはないのですが。このような経験をお持ちの方、アドバイスをお願いいたします。

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