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線虫のガラスビーズによる破砕 トピック削除
No.4228-TOPIC - 2007/05/16 (水) 16:05:35 - 神経科学者
線虫を破砕し、mRNAをより効率よく回収することを目指しています。
そのため、効率のよい線虫の破砕方法を探していて、
現在のところガラスビーズを利用しようと考えています。
しかしながら具体的なプロトコールがなく悩んでいます。
どなたか、よいプロトコールをご存知ないでしょうか。
例えば、線虫何匹に対し、粒径どの程度のガラスビーズを
どのぐらい加えるとか分かれば幸いです。
宜しくお願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.4228-4 - 2007/05/18 (金) 14:41:42 - 神経科学者
雅さま

ご返答有り難うございます。
教えて頂いた方法も一つの方法だと思うのですが、
RNAの回収率をできるだけあげたいと
思っており、教えて頂いた方法では、
回収率がどの程度なのか少しわかりません。
もし何か情報がありましたら、教えて
頂けないでしょうか。お願いします。

ガラスビーズは使いませんが・・・ 削除/引用
No.4228-3 - 2007/05/17 (木) 13:13:20 - 雅
　当研究室に線虫に詳しい人がおりますのでちょいと訊いてみましたところ，0.5% SDS を含む Lysis Buf. を適当量 C.ele に加え，55 ℃で 1hr 〜 O/N incubate．その後フェノール・クロロホルムで RNA を回収しているそうです．
　ガラスビーズ利用にこだわらないのであれば，こういった方法はどうでしょう．

線虫のガラスビーズによる破砕 削除/引用
No.4228-1 - 2007/05/16 (水) 16:05:35 - 神経科学者
線虫を破砕し、mRNAをより効率よく回収することを目指しています。
そのため、効率のよい線虫の破砕方法を探していて、
現在のところガラスビーズを利用しようと考えています。
しかしながら具体的なプロトコールがなく悩んでいます。
どなたか、よいプロトコールをご存知ないでしょうか。
例えば、線虫何匹に対し、粒径どの程度のガラスビーズを
どのぐらい加えるとか分かれば幸いです。
宜しくお願いします。
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