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細胞周期の固定 トピック削除
No.4442-TOPIC - 2007/06/21 (木) 12:08:44 - ヘルプ23
細胞周期の固定で質問があります!
接着細胞をそのままプレートで、PI染色でみたいのですが、
通常70%エタノール固定でやってますが、

下記についてはどう、おもわれますか?

パラホルムアルデヒドで、そのあと、透過性をあげるため、TritonX-100などで処理してから、PI染色する。

ご存知の方がいらっしゃいましたら、よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4442-2 - 2007/06/21 (木) 14:21:47 - 通りすがり
>パラホルムアルデヒドで、そのあと、透過性をあげるため、TritonX-100などで
>処理してから、PI染色する。

できますよ、昔の参考書とかにはきちんと載ってるやりかたです。
特別なやりかたではありません。

ただEtOHのほうが固定と膜透過を同時にできるし、シグナルがクリアな気はします。透過力とかが界面活性剤より強いからかもしれません。

あとそのまま保存もできて楽なので、
みんなEtOHでやるのが一般的になってますが。

細胞周期の固定 削除/引用
No.4442-1 - 2007/06/21 (木) 12:08:44 - ヘルプ23
細胞周期の固定で質問があります!
接着細胞をそのままプレートで、PI染色でみたいのですが、
通常70%エタノール固定でやってますが、

下記についてはどう、おもわれますか?

パラホルムアルデヒドで、そのあと、透過性をあげるため、TritonX-100などで処理してから、PI染色する。

ご存知の方がいらっしゃいましたら、よろしくお願いいたします。

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