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肝細胞株と初代培養について トピック削除
No.4477-TOPIC - 2007/06/28 (木) 13:07:39 - 肝細胞初心者
 いつも参考にさせていただいています.
 今度,肝臓に焦点を当てた代謝の実験系を考えています.マウスの肝細胞株はいくつかありますが,基本的には癌細胞由来のようです.
 手始めとしてcell lineを使いたいのですが,あくまでcell lineは癌細胞であって,正常肝細胞とは異なるという認識なのでしょうか.やはり初代培養の実験は必須なのでしょうか.
 実験の内容としては,肝細胞由来のpro-inflammatory因子の発現,およびインスリンシグナルの検討です.
 何しろ初心者なもので,ご教授頂ければありがたいです.
 
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初代肝細胞の件につきまして 削除/引用
No.4477-3 - 2007/08/22 (水) 23:57:23 - sakasama
ブタとラット(マウス)の初代肝細胞を以前使っていました。


分離があまり上手でなかったからかもしれませんが、ラットやマウスの初代肝細胞は、分離後 1 週間程度しか培養できませんでした。

このため、これらの動物の初代肝細胞を使った実験は、分離した日から 3 日(1 日の方が確実ですが)以内に終わるように設計した方が良いかもしれません。
(上手に分離できれば大丈夫かもしれませんが)


ブタの方は、分離がちょっと大事ですが、ラットよりは長期間培養できたと記憶しています(2 週間程度)。



初代肝細胞を使って実験している人は、株細胞は正常細胞ではないので、株細胞で得た実験結果は正常肝細胞に反映されるとは限らないと思っている方が多いのではないかと思います。

けれど、実験の最終的な目的にもよると思いますが、「株細胞で得た結果では不足である」ということにはならないと思います。


Kazu 様がおっしゃっておられるように、初代細胞を使っても結果が出たら、それは株細胞のみを用いたときよりも、価値が高まるのではないかと思います。

primary culture 削除/引用
No.4477-2 - 2007/06/28 (木) 13:24:15 - Kazu
primary cultureは毎回肝細胞を分離する必要があるので大変です。

しかも、primary cultureの方が一般的にデータが出にくいという問題もあります。

しかし、いいデータがでればcell lineよりはimpactは高くなるでしょう。

肝細胞株と初代培養について 削除/引用
No.4477-1 - 2007/06/28 (木) 13:07:39 - 肝細胞初心者
 いつも参考にさせていただいています.
 今度,肝臓に焦点を当てた代謝の実験系を考えています.マウスの肝細胞株はいくつかありますが,基本的には癌細胞由来のようです.
 手始めとしてcell lineを使いたいのですが,あくまでcell lineは癌細胞であって,正常肝細胞とは異なるという認識なのでしょうか.やはり初代培養の実験は必須なのでしょうか.
 実験の内容としては,肝細胞由来のpro-inflammatory因子の発現,およびインスリンシグナルの検討です.
 何しろ初心者なもので,ご教授頂ければありがたいです.

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