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う〜ん 削除/引用 No.4535-3 - 2007/07/12 (木) 16:26:58 - さとし ELISAはStandardのブランクでも吸光度はある程度出ます。 ブランクの吸光度が小数点以下２桁前半であればよいELISAだと思います。 ブランクが0.2などになっている場合は 洗浄が足りないか、発色時間が変に長いか、 あまり良いELISAキットではないと判断できます。 発色から停止させるまでの反応時間が違うとずれますが ウェルごとに反応時間を一定にしていますか？ あとは、Washのステップを取説よりも長めにしっかりやってみてください。 最後は5分ぐらいシェイクしていても良いと思います。

ELISANo 削除/引用 No.4535-2 - 2007/07/11 (水) 20:50:48 - 仕事中

ＥＬＩＳＡの検定曲線について 削除/引用 No.4535-1 - 2007/07/11 (水) 17:43:12 - えらいざー いつも参考にさせていただいております。 マウスのサイトカインをserumで計っています。 検定曲線を作成する際に、ELISAキットの標準液と緩衝液を使っているのですが検体なしの０のところでもある程度吸光度が出ます。0のところを当然ブランクにするべきなのですが０をブランクにするとほとんどの検体がブランク以下になってしまい測定の意味がなくなってしまい困っています。 文献的には存在するはずのサイトカインなのですべてが検出限界以下というわけでもないはずなのですが。 このように標準曲線の０のところでもある程度の吸光度が生じるものなのでしょうか。 それと標準曲線はｎ=２で測定していますが同じ濃度のものでも結構ばらつきが出ます。希釈などの手技には問題ないと思うのですがこれは仕方ないのでしょうか。

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