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ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ トピック削除
No.4545-TOPIC - 2007/07/14 (土) 11:04:38 - ラク
研究を始めたばかりのものです。大変基本的な質問で恐縮ですが、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子は、カナマイシンに耐性をしめすために選択マーカーとして使用されるのですか?
形質転換体をカナマイシン培地で選抜して、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼの働きによる葉組織のアッセイによるスクリーニングとはどういうことなのでしょうか?
スクリーニングと選抜の定義の違いがもうひとつよくわかりません。。
説明をお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4545-3 - 2007/07/14 (土) 12:04:25 - カナマイシン
・・・と思ったけど少し誤解を招く表現がありますね。

一見するとblaとカナマイシン/ネオマイシン耐性遺伝子を混同しそうですが、
「bla」→ベータラクタマーゼ遺伝子。大腸菌でアンピシリン等に耐性を付与。
「カナマイシン耐性遺伝子」→大腸菌内ではカナマイシンにもネオマイシンにも耐性を付与。真核細胞内ではネオマイシンに耐性を付与。カナマイシンはもともと真核には効かない(リボソームの構成の関係上)。

ということです。かえってわかりにくい??

(無題) 削除/引用
No.4545-2 - 2007/07/14 (土) 11:52:12 - カナマイシン
植物屋ではないので葉組織はよくわかりませんが、
カナマイシン/ネオマイシン耐性については
http://homepage2.nifty.com/transbio1/Index.html
の「プラスミド」のページがわかりやすく記述されているように思います。
いかがでしょう?

ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ 削除/引用
No.4545-1 - 2007/07/14 (土) 11:04:38 - ラク
研究を始めたばかりのものです。大変基本的な質問で恐縮ですが、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子は、カナマイシンに耐性をしめすために選択マーカーとして使用されるのですか?
形質転換体をカナマイシン培地で選抜して、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼの働きによる葉組織のアッセイによるスクリーニングとはどういうことなのでしょうか?
スクリーニングと選抜の定義の違いがもうひとつよくわかりません。。
説明をお願いいたします。

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