>[Re:3] RIさんは書きました :
UTPのhot:cold=1:100なら500bpの中に平均10ヶ所取り込まれているはず。２週間なら半減期なので、このうち５ヶ所は崩壊している計算になります。
RIさんありがとうございました。
確かにPが崩壊するので、切れるというのがまっ先に頭に浮かびますね。そういえばバンドがスメアーになりクリヤーな結果にならない時もあります。でもそうでないこともあるのでどうかなぁと思ったりするわけです。どれぐらいの32PーUTPが取り込まれているかも考えるべきですね。学生のころはそういうところはなるだけクリアーにして実験してましたが最近はてを抜いてしまうことがたたあります。結局のところ可也切れているだろうと予測できますね。DNAの末端ラベルとは違い可也注意が必要だと言うのが見えてきました。あと気になったのは放射能による活性酸素の塩基への攻撃です。これも二重鎖のDNAと違って、塩基が露出しているためDNAよりかなりセンシティブのようにも思えます。
>[Re:2] カナマイシンさんは書きました :
> DNAはいくらでも保存可能な気がしています（もちろん減衰はありますが）。
> 水に溶解、２週間は全然大丈夫ですね。１ヶ月でもいけるんじゃないかな。
> DIGでも全然大丈夫です。
> RNAに特異的な現象ですかね？？
カナマイシンさんありがとうございました。
上記のようにRNAのUTPの取り込みによるラベルのためなん点かこの方法に特徴的な懸念があります。でもDNAの末端ラベルは保存という意味では可也大丈夫ということが分かりました。RNAもPNKとかで末端ラベルするともっと持つかもしれませんね。どなたかそういう方法でやっている人はいませんかね。 |
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