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Hisタグ融合蛋白質が溶けません トピック削除
No.4604-TOPIC - 2007/07/25 (水) 00:24:34 - エアロ
His-tag融合で蛋白質の発現検討を行っております。温度は37、30、25℃で誘導はIPTG終濃度が0.1〜1mMで誘導後2h、4hで条件を変えたのですがまったく可溶に発現しません。なにかいい方法はないでしょうか？

ちなみに目的物はアミノ酸96個（システインが5個、pIが8.37）と110個（システインが1個、pIが6.92）です。宿主はBL21(DE3)codon plus RILでベクターはpET15bです。

ちなみにGST融合でも不溶でした…(誘導条件もいろいろ検討しました)。

なにか原因や対策、アドバイスお願いします。どんな些細なことでもかまいません。なにかほかに知りたい情報があれば返信していきたいと思いますのでよろしくお願いします。
　
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Hisタグ融合蛋白質が溶けません 削除/引用
No.4604-1 - 2007/07/25 (水) 00:24:34 - エアロ
His-tag融合で蛋白質の発現検討を行っております。温度は37、30、25℃で誘導はIPTG終濃度が0.1〜1mMで誘導後2h、4hで条件を変えたのですがまったく可溶に発現しません。なにかいい方法はないでしょうか？

ちなみに目的物はアミノ酸96個（システインが5個、pIが8.37）と110個（システインが1個、pIが6.92）です。宿主はBL21(DE3)codon plus RILでベクターはpET15bです。

ちなみにGST融合でも不溶でした…(誘導条件もいろいろ検討しました)。

なにか原因や対策、アドバイスお願いします。どんな些細なことでもかまいません。なにかほかに知りたい情報があれば返信していきたいと思いますのでよろしくお願いします。
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