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好中球とマクロファージの抗体を探しています(筋肉) トピック削除
No.997-TOPIC - 2005/03/26 (土) 21:53:45 - MK
先日も同じようなことを書いたのですが,抗体の情報などを書いていなかったので,もう一度書き込みをさせていただきます.現在,蛍光免疫染色(凍結切片)で好中球とマクロファージ(単球)を別々に染色しようとしています.対象はマウスの筋肉です.好中球の染色ではLy-6G(BD Pharmingen社)、マクロファージの染色ではF4/80(CEDARLANE社)またはF4/80(Serotec社)という1次抗体を使用して染色したのですが,きれいな染色は得られませんでした.どなたかいい抗体をご存知であれば教えていただきたいのですが.よろしくお願いいたします.
 
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No.997-4 - 2007/08/28 (火) 05:36:59 - sea
(1) 目的のシグナルが得られているのにバックグラウンドが高くて
きれいじゃない

(2) 目的のシグナル自体が得られていない

のいずれの状態なのかによって対応が変わってくると思います。
また、「別々に染色」というのは二重染色じゃなくてそれぞれ別の切片で染めている、ということですよね?

私は筋肉の染色の経験はありませんが、
念のために固定法と固定のタイミングなどについても書いていただくと参考になるかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.997-3 - 2007/08/23 (木) 13:51:03 - boboco
Ly-6G(BD Pharmingen社)もF4/80(BD Pharmingen社)も綺麗に出ますよ。
2次抗体やブロッキングの方法を検討してみては?

(無題) 削除/引用
No.997-2 - 2005/05/19 (木) 14:05:51 - Jay
好中球の染色ではGr-1(BD Pharmingen社)、マクロファージの染色ではMac-1(BD Pharmingen社)、いずれも、ラットのモノクロなので、マウスの組織(筋肉を含む)では、二次抗体がエンドのIgGをひろって、バックが出てしまいます。ぼくは、ラットのモノクロをマウスの組織に使うときも、MOM Kit (Vector Lab)をつかって、エンドのIgGをブロックしています。

好中球とマクロファージの抗体を探しています(筋肉) 削除/引用
No.997-1 - 2005/03/26 (土) 21:53:45 - MK
先日も同じようなことを書いたのですが,抗体の情報などを書いていなかったので,もう一度書き込みをさせていただきます.現在,蛍光免疫染色(凍結切片)で好中球とマクロファージ(単球)を別々に染色しようとしています.対象はマウスの筋肉です.好中球の染色ではLy-6G(BD Pharmingen社)、マクロファージの染色ではF4/80(CEDARLANE社)またはF4/80(Serotec社)という1次抗体を使用して染色したのですが,きれいな染色は得られませんでした.どなたかいい抗体をご存知であれば教えていただきたいのですが.よろしくお願いいたします.

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