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(無題) 削除/引用 No.1232-2 - 2008/06/12 (木) 22:59:03 - MK primaryでChIP assayを経験は無いのですが、一度培養条件下にしてしまえば他の培養細胞とそれほど変わらないのではないでしょうか？ hahaさんがChIPassayに用いている抗体は培養細胞等でChIPassayが出来ることをあらかじめ確認してある抗体でしょうか？ IgGでバックがでたり、目的の抗体でのIP効率が悪いのはDNAの断片化が不十分な時に起こりやすい印象を受けます。断片化の度合いを一度確認してみてはどうでしょうか？

primary細胞での転写因子CHIPアッセイ 削除/引用 No.1232-1 - 2008/06/01 (日) 14:22:35 - haha いつも勉強させていただいております。 上記のようにprimary culuture細胞でのCHIPassayを始めました。 ヒストンとかではなく、転写因子に対するものを行っていますが、なかなかうまくいきません。 IgGでバンドが出てしまい、目的のバンドとIｇGバンドとの差が少しあるくらいです。 論文などでは、多くはcell lineでのchipなようなきがします。 どなたかprimaryで行われた方おられませんか？primaryだとどうしても細胞の数が少なくなっていまい、うまくいかないのではないかと思っております。

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