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CBB染色ゲルWestern blot
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No.1316-TOPIC - 2008/06/12 (木) 10:04:06 -
western
SDS PAGE 後CBB染色したゲルをメンブレンに転写して
WEstern blot を行うことは可能でしょうか?
脱色液の酢酸やメタノールでタンパクが
ゲル内に固定されてしまっていると 転写はできないものでしょうか?
よろしくお願い致します。
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No.1316-3 - 2008/06/13 (金) 19:35:14 - A
>[Re:1] westernさんは書きました :
> SDS PAGE 後CBB染色したゲルをメンブレンに転写して
> WEstern blot を行うことは可能でしょうか?
> 脱色液の酢酸やメタノールでタンパクが
> ゲル内に固定されてしまっていると 転写はできないものでしょうか?
> よろしくお願い致します。
BlotはSDSによって負に帯電した蛋白質の電荷を元に行っていますから
分子量によっては可能かもしれませんが固定された時点でゲル中から
の移動が基本的には出来ないのでは。一般的にはやりませんね。
もしどうしてもというのであれば以下のトピの最後に書かれている
リファレンスのように(その論文は銀染色ですが)
切り出したバンドから蛋白質を抽出して泳動しなおすことになるのでは。
http://www.kenkyuu.net/cgi-biotech2/biotechforum.cgi?mode=view;Code=1153
(無題)
削除/引用
No.1316-2 - 2008/06/12 (木) 10:56:45 -
ゆい
一部できます。これが意味のあるものかはわかりません。何かが写ってます。
しかし、転写されたものが染色液/脱色液に影響を受けなかったタンパクなのか、あるいは染色/脱色されたんだけれども転写されたのかは判別出来ませんですよね。
基本的にはやりません。
CBB染色ゲルWestern blot
削除/引用
No.1316-1 - 2008/06/12 (木) 10:04:06 -
western
SDS PAGE 後CBB染色したゲルをメンブレンに転写して
WEstern blot を行うことは可能でしょうか?
脱色液の酢酸やメタノールでタンパクが
ゲル内に固定されてしまっていると 転写はできないものでしょうか?
よろしくお願い致します。
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