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(無題) 削除/引用 No.1177-7 - 2010/03/10 (水) 10:41:03 - ぽむ。 LPSで刺激してみては？

(無題) 削除/引用 No.1177-6 - 2008/05/21 (水) 21:53:46 - yyy 細胞内のproIL1-betaは検出できています。 ELISAも考えているのですが、費用的に厳しいです・・・。 やはり、paperを出しているラボに聞くべきですよね。 皆さん、ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.1177-5 - 2008/05/21 (水) 21:16:50 - TK-1 細胞ないでのpro-IL1bの発現は確認できていますか？こういうことは、paperを出しているラボに聞く方が早いです。Jurg Tschoppのラボにでも聞いてみればいかがですか。

(無題) 削除/引用 No.1177-4 - 2008/05/21 (水) 17:00:28 - おお ウエスタンでなく、まずはELISAで感度のよさそうな系をさがして、量を測ってみたらどうでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.1177-3 - 2008/05/21 (水) 14:38:57 - yyy １）培養条件 1×10exp6のTHP1を40nMのPMAで12時間分化させ、Medium(RPMI)交換して、プレートに付着していない細胞を取り除いています。24時間後、OptiMEMに100μg/μl加えた尿酸を、1mLずつ各プレートに培地交換しています。16時間後に上清と細胞を回収します。 ２）sup.でのIL-1beta量 まったく経験のない初心者なので量など測ったことがなく、わかりません。すいません。

(無題) 削除/引用 No.1177-2 - 2008/05/21 (水) 14:24:18 - blot もし良ければ、 １）培養条件 ２）sup.でのIL-1beta量 を、教えて下さい。

IL1betaのWestern Blotting 削除/引用 No.1177-1 - 2008/05/21 (水) 14:17:43 - yyy Medium中に放出されるIL1betaをWesternで検出したいのですが、検出できません。 現在、分化させたTHP1を尿酸結晶で刺激して、Medium中のタンパクを10%TCAで沈澱させ、それをSDS-PAGEしています。 細胞の抽出液からは、proIL1bが検出されるので抗体とWesternには問題ない気がします。THP1も貪食能には問題ありません。 御教授お願いします。

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