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(無題) 削除/引用 No.1258-8 - 2009/02/07 (土) 01:17:52 - CJ 抱埋前法でしたら染まらない理由は １．固定の強さ：グルタールアルデヒドの含有量 ２．抗体の浸透の問題：膜タンパクの場合は弱い洗剤、エタノール、凍結融解などの技法が必要になる場合がある。 が代表的です。まずは普通のDAB染色が成功するか試してみては？膜の染色を見たいのなら、ナノゴールド２次抗体を銀増感、というのがメジャーですが、初心者向けではないですね。 後抱埋法では条件はなかなかシビアです。ただ親水性樹脂を低温重合すれば結構いろいろな抗体が使えるようです。 それにしても質問が漠然としていてどう答えてよいのやら…

GFP抗体なら 削除/引用 No.1258-7 - 2009/02/05 (木) 16:29:06 - Freedom GFP抗体なら幾つか免疫電顕でも使える市販の抗体があります。 私はMolecuar Probes(Invitrogen)のGFPポリクロ抗体(A-11122)を使ったことがありますが良くワークしました。あと、AbcamのポリクロGFP抗体も良いそうです(こちらは値段が高いですが)。 その他、FLAG抗体(シグマのM2)を免疫電顕に使っていた文献がありましたが、今のロットでワークするか分かりません。 また、タグではないですがAlexa488のポリクロ抗体がInvitrogenから出ており、これも免疫電顕に使えます。

(無題) 削除/引用 No.1258-6 - 2008/08/02 (土) 01:43:16 - sea >関連の質問をさせていただいてもよろしいでしょうか？ 新しい質問は別のトピックではじめられた方が あなたのご質問も注目され易いと思うので いいのじゃないか、と思うのですが。 その方がオリジナルの議題の焦点もぼけないし。

オタマジャクシ 削除/引用 No.1258-5 - 2008/08/01 (金) 18:16:13 - カエル zenopusの飼い方や、オタマジャクシの飼い方、また、オタマジャクシの組織固定方法など詳しいほんや、サイト、もしくは、詳しい方、教えて下さい。宜しくお願い致します。

免疫電顕に利用するTag 削除/引用 No.1258-4 - 2008/06/17 (火) 20:57:58 - お邪魔します 関連の質問をさせていただいてもよろしいでしょうか？ 金コロイド標識した抗体を用いた免疫電顕を行いたいと思っております。 ただ作成したベクターのコンストラクト的に ６×Histidineタグを利用するしかないのですが、 一般的にこのように小さいTagを利用するというのは珍しいのでしょうか？ 文献をあさってもなかなかHisを用いている例が無いようで。。。 教えていただけますと大変助かります。 よろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.1258-3 - 2008/06/05 (木) 10:34:41 - 組織 手技の確立をされたいのであれば、免疫染色でその細胞に染まる抗体は大抵使えると思います。 ただ、細胞小器官とか細胞骨格のマーカーの方が、電顕で抗体の特異性を確認しやすいと思います。 ラボでそういう抗体をお持ちなら、試されてみてはどうでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.1258-2 - 2008/06/05 (木) 10:23:41 - 組織 免疫染色で少しは染まりますか？ 免疫染色で全くシグナルが見えないものを免疫電顕で見るのは難しいと思います。 抗体は基本的に免疫染色と同じものが使えると思います。 免疫電顕の検出法も教えてください。 （DAB、金コロイドなど） それと、電顕で目的の細胞が見えてますか？ 電顕の手技が問題ないかも確認させてください。

免疫電顕の抗体 削除/引用 No.1258-1 - 2008/06/04 (水) 18:34:15 - いー子 最近、培養細胞の免疫電顕を始めました。 最終的にはGFP蛋白やエンドソームなどの膜系の免疫電顕を行うつもりです。 ですが今使用している抗体では全く染色できていません。腕の問題なのか抗体の問題なのかがわかりません。 そこで免疫電顕に使用できる市販の抗体を使用して免疫電顕自体ができていることを確かめたいと思っています。 GFP抗体やエンドソーム系の抗体に限らず、どなたか免疫電顕に使える入手可能な抗体をご存知ないでしょうか？ よろしくお願いします。

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