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(無題) 削除/引用 No.2744-4 - 2009/01/28 (水) 17:30:46 - 弘法 追加です。 酵母のO/Nカルチャーは、10^8 cells/mLのオーダーでしょうか。大腸菌ならその10倍以上は増えるでしょうから、マルチコピーのプラスミドを使っていたとしても、同じ容量の酵母の培養から取れるプラスミドの量がそれに応じて少ないのは当然です。

(無題) 削除/引用 No.2744-3 - 2009/01/28 (水) 10:22:48 - おお シーケンスが目的なら、PCRし、精製してシーケンスというのも 可能ですが、、、

(無題) 削除/引用 No.2744-2 - 2009/01/27 (火) 21:12:18 - 弘法 状況が良くわからないのですが、酵母からプラスミドを調製するのは収量の点から厳しいので、粗精製されたプラスミドで大腸菌を形質転換し、その形質転換体から増やすのが普通です。

出芽酵母からプラスミド抽出（キットなし） 削除/引用 No.2744-1 - 2009/01/27 (火) 20:34:32 - KKK いつも勉強させてもらっています。 ある事情で出芽酵母からシークエンスグレードのプラスミドを抽出しなければならず、良い方法を探しています。キットを使用すればよいのですが、出来ればマニュアルで行いたいと思っております。 現在、行っている方法はザイモリアーゼで細胞壁を消化した後に、大腸菌からプラスミドを抽出するキットを使用しているのですが濃度、純度ともによくありません。 どなたか出芽酵母からプラスミドを抽出する良い方法が載っている文献（自分で調べた限りではありませんでした。）および方法をご存じの方いらっしゃいますでしょうか？

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