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(無題) 削除/引用 No.2757-5 - 2009/01/31 (土) 16:18:33 - 名無し TBSTはしらべてないからわかんないけどPBSとかだとスキムミルクとか3とか5％とか高濃度で溶かすとpHさがるでしょう、pH6.9くらいまで。（たぶんBSAでもそうかもしれない）。だから少しpH高めにしておくとそういうのとかしたときちょうどpH7.4くらいにくるのでいいのかもしれない。

ただ単に： 削除/引用 No.2757-4 - 2009/01/29 (木) 20:46:32 - りょう トリスの酸解離定数pKaが8.0だからｐH８が一番緩衝作用大きい。 だからTBSTでpH8を使用する人がいるのでは？ でも抗原抗体反応のwashに使用するなら7.4-7.5がベストのような気がするし、こちらの方がメジャーな気がします。 別に８で問題ないでしょうが。

たしかに。 削除/引用 No.2757-3 - 2009/01/29 (木) 19:30:45 - TS おっしゃるとおりですね。ｐH8.0でうまくいっているので、あえて変更しない方が良いかもしれないです。 ただ、生理的なpHが7.4だととして、それを選択するのが自然な感じがするのに、私の調べた感じだと、pH8.0を使用しているラボも結構あるような気がします。それで、pH8.0のメリットみたいのがあるのかなという疑問が残っています。 ご存じの方とかいないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.2757-2 - 2009/01/29 (木) 16:47:24 - あべちゃん 血中のpHは7.40ですよね。 抗原ー抗体反応が血中で行われることを考えれば、pH7.4付近が良いと思います。 でも、８．０で問題ないのであれば、気になさらなくてもいいんじゃないでしょうか？

TBSTのｐHは、7.5 or 8.0? 削除/引用 No.2757-1 - 2009/01/29 (木) 16:00:09 - TS いつも勉強させてもらっています。 素人のような質問で恐縮ですが、Western blottingの時の抗体希釈や洗浄に使用するTBSTのpHについての質問です。 私は、pH 8.0のものを使用しているのですが、プロトコールなどを調べるとpH7.5 or 7.4となっているものが多いと感じました。 これまで、かなりの数のWBをしており、特に問題を感じていないのですが、どちらがより一般的で、より良いと思われているのかと、ふと疑問に思って質問させてもらいました。 実際のところ、疑問に思った経緯としては、先日学生が誤ってpHを8.3で調製し、シグナルが弱く出るような感じを受け、それなら8.0よりも7.5程度の方がより生理的なpHだし無難なのかな、とも思ったりもしました。 皆さんの経験と感触を教えてもらえたらと思います。 よろしくお願いします。

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