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Tet repressorの免疫染色用抗体 トピック削除
No.1207-TOPIC - 2011/11/14 (月) 13:39:36 - たなか
いつも参考にさせて頂いてます。

このたび、Clontech社のpTet-On Advanced systemを用いたTetracyclin誘導系による
transgenicマウスの作製を検討しています。

既にTgマウスは産まれており、遺伝子伝達もPCRにより確認出来ており、
よりTet repressorタンパクを発現しているstrainを選抜したいと考えています。

Tet repressor発現確認に際し、Western blot、組織免疫染色を検討しているのですが、
組織免疫染色可能な市販抗体がありませんでした。

どなたかTet repressoの組織免疫染色をおこなっている方はいらっしゃいませんか?
用いている抗体を教えて頂ければ幸いです。

宜しくお願い致します。
 
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市販品ありますね 削除/引用
No.1207-5 - 2011/11/18 (金) 10:37:48 - mon
ググると、数社で販売していますね。
http://www.mobitec.de/int/products/bio/05_antibodies/anti_tet.html
ここには、免染に使える抗体がありますね。

(無題) 削除/引用
No.1207-3 - 2011/11/15 (火) 23:19:27 - たなか
Harmoniaさんフォローありがとうございます。

> TetA (R?) を発現するマウスを作ったのですか?
> Tetプロモーターの目的遺伝子Tgを作ったのですか?

Tet R(Tet repressor)発現マウスとTet-promoter下流に目的遺伝子を
組換えたマウスの二種類を作製しました。

将来的に2つのstrainを交配し、目的遺伝子をTetracyclin誘導的に
発現するマウスを得るのが目的です。

このトピックの主旨はTetR発現マウスにおけるTetRの発現確認方法で
免疫染色の見地を得たいと願っております。
まぁ免染が無理ならwester blotすれば済む話なのですが...

> >既にTgマウスは産まれており
> は、どういうgenotype?

受精卵インジェクションによるヘテロ接合体を得ています。

知識不足で的をはずした、または不足した返答になってるかも知れません。
フォローいただければ幸いです。

(無題) 削除/引用
No.1207-2 - 2011/11/15 (火) 08:15:58 - Harmonia
やりたいことの真意が分からないのですが。

TetA (R?) を発現するマウスを作ったのですか?
Tetプロモーターの目的遺伝子Tgを作ったのですか?

>既にTgマウスは産まれており
は、どういうgenotype?

Tet repressorの免疫染色用抗体 削除/引用
No.1207-1 - 2011/11/14 (月) 13:39:36 - たなか
いつも参考にさせて頂いてます。

このたび、Clontech社のpTet-On Advanced systemを用いたTetracyclin誘導系による
transgenicマウスの作製を検討しています。

既にTgマウスは産まれており、遺伝子伝達もPCRにより確認出来ており、
よりTet repressorタンパクを発現しているstrainを選抜したいと考えています。

Tet repressor発現確認に際し、Western blot、組織免疫染色を検討しているのですが、
組織免疫染色可能な市販抗体がありませんでした。

どなたかTet repressoの組織免疫染色をおこなっている方はいらっしゃいませんか?
用いている抗体を教えて頂ければ幸いです。

宜しくお願い致します。

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