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(無題) 削除/引用 No.1321-2 - 2011/12/17 (土) 11:10:58 - モモ 経験者ではないですが、ほかにレスが付かないようですので思いつく点をひとつ。 RNAではないですが、オリゴDNAを脱塩精製で注文したものをPAGEで流すと目的の長さ以外にも近くに何本かバンドが見られます。合成過程で目的の産物以外のDNAも精製されていると考えられます。RNA合成でも同じことが起こると考えると、ノックダウンの実験には適さないことが想像できると思います。PAGE精製やHPLC精製が必要なのはマウスへの投与に限らず、培養細胞でも同じと考えます。

マウスtransfection用siRNAのグレード 削除/引用 No.1321-1 - 2011/12/11 (日) 11:23:21 - in situ お世話になっています。 今回、siRNAをマウスにtransfectionするという実験を行うことになりました。 全身投与の予定なので、1回1マウスあたり、25ugという結構多めのsiRNAが必要になります。 siRNA transfectionキット（一応AteloGeneを使用予定です）には、PAGE精製もしくはHPLC精製グレードのものを推奨と書かれているわけですが、これらの値段は、メーカーにもよりますが脱塩のものと比べて数万（/200ugくらい）違います。 生体投与するにおいて、PAGE精製もしくはHPLC精製であった方がいいという理由は何かあるのでしょうか。 生体投与に持っていく前に、vitroでknock down効果があることは確認するつもりですので、vivo特有の理由があれば知りたいです。 経験者の方の助言をお待ちしています。 よろしくお願いします。

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