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肝非実質細胞分離の時のパーコール密度勾配遠心 トピック削除
No.1368-TOPIC - 2011/12/22 (木) 00:15:53 - 肝非実質細胞
いつも大変お世話になっております。
肝臓からのリンパ球あるいは非実質細胞分離の時のパーコール密度勾配遠心に関して教えてください。
論文を検索すると33%パーコールあるいは40%パーコールで、細胞を遠心、するとペレットにリンパ球、非実質細胞が得られるとあります。その時上清には肝細胞が分離されるようです。ここでどうしても分からないのが、肝細胞は密度1.08~1.09と他の細胞より密度が高いはずなのに、どうしてペレットにいかず、上清にあつまるのかということです。
いろいろ検索しても分かりません。
Optiprepで非実質細胞を分離する時は、非実質細胞よりやや重い密度に調整したOptiprepに細胞を混ぜ遠心、すると非実質細胞は浮いて、デブリや肝細胞、赤血球はペレットになると思います。これは感覚的によく分かります。
でもどうして33%パーコールのやり方だと逆になるのでしょうか。
どなたかご教授頂ければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.1368-2 - 2011/12/23 (金) 13:49:17 - katute
確かに不思議ですね、パーコールでの肝実質細胞の分離はよくやってましたが、気がつきませんでした。その数値がどうやって求められたのかはわかりませんが、ともかくパーコールとOptiprepで逆転するのですか。そもそもなぜシリカ粒子で密度勾配ができるのか、理解できてません。

経験的には、膜分画の分離においてもpercollとOptiprepは異なる分離パターンになる場合が多いので、あり得そうですが、理屈はなんでしょう?どなたか教えて欲しいところです。

肝非実質細胞分離の時のパーコール密度勾配遠心 削除/引用
No.1368-1 - 2011/12/22 (木) 00:15:53 - 肝非実質細胞
いつも大変お世話になっております。
肝臓からのリンパ球あるいは非実質細胞分離の時のパーコール密度勾配遠心に関して教えてください。
論文を検索すると33%パーコールあるいは40%パーコールで、細胞を遠心、するとペレットにリンパ球、非実質細胞が得られるとあります。その時上清には肝細胞が分離されるようです。ここでどうしても分からないのが、肝細胞は密度1.08~1.09と他の細胞より密度が高いはずなのに、どうしてペレットにいかず、上清にあつまるのかということです。
いろいろ検索しても分かりません。
Optiprepで非実質細胞を分離する時は、非実質細胞よりやや重い密度に調整したOptiprepに細胞を混ぜ遠心、すると非実質細胞は浮いて、デブリや肝細胞、赤血球はペレットになると思います。これは感覚的によく分かります。
でもどうして33%パーコールのやり方だと逆になるのでしょうか。
どなたかご教授頂ければ幸いです。

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