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(無題) 削除/引用 No.1393-2 - 2012/01/04 (水) 01:12:02 - stemcell 自分はリンホ使ってますが、今まで3年間ほどやっていてそのようなことは起こったことがありません。前処理はどのようにしていますでしょうか？ 自分は… ・ヘパリン加シリンジで骨髄採取。 ・氷冷上で保存し、実験室へ。 ・37度で軽くインキュベート→脂肪を再溶解。 ・無血清培地で混和しながらセルストレイナーへ。 ・重層し、素早く1350rpm30minRT ・中間層を遠沈管へ。 ・PBS加えデキャンディング。 溶血剤を入れて遠心後単核細胞層のみが採取できています。 どこか違いがございませんか？

フィコール遠心後の細胞回収 削除/引用 No.1393-1 - 2012/01/02 (月) 16:21:42 - 蟋蟀 フィコール（GE Healthcare Ficol Paque PREMIUM)を用いてマウス末血および骨髄を分離しています。 遠心後の中間層を別チューブにとって10倍量の生理食塩水で洗浄しているのですが、細胞がほとんどチューブの壁面について大幅に回収量が減ってしまいます。 チューブはグライナーの50mLチューブ、遠心は1500rpm(約600g)、スイングローターで行っています。 洗浄液を1%BSA添加PBSや10%血清入り培地に変えてもチューブ壁面への細胞付着が防げませんでした。 回収量を上げるための改善策がありましたらご教示下さい。 よろしくお願いします。

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