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(無題) 削除/引用 No.152-6 - 2011/03/14 (月) 14:37:27 - オレンジ 何を補正するのか分かりませんが、それでは論文として通用しないと思います。 貯金が沢山あっても、毎月湯水のようにお金を使う人もいれば、 慎ましく暮らす人もいますよね。 「貯蔵量と放出量に相関がある」と言いたいなら、 まずその事自体を実験的に証明するか、 それを証明した論文を探すしかないでしょう。

(無題) 削除/引用 No.152-5 - 2011/03/14 (月) 13:11:45 - neuron オレンジさん ありがとうございます。 やはりそこまでは反映されないですよね。 神経末端にあるタンパク質をウエスタンしてその量で補正をかけてもだめでしょうか？もし可能であれば、指標となるタンパクはありますでしょうか？ ちなみに測定したいマウスは、特になにも刺激していない（人為的に）状態、つまり定常状態でも、ある場所における分泌が高いのではないかという仮説に基づいています。 免疫染色も平行して進めていこうと考えております。 真摯に回答して頂いて本当にありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.152-4 - 2011/03/14 (月) 12:48:58 - オレンジ 多分ムリです。 単にその組織にある神経末端の数に比例するだけでしょう。 それが実際に放出されているかどうかは別問題です。 もちろん、長期的に見れば使われないシナプスは退縮していきますから どこかのタイミングで使われてはいるのでしょうが、 何か特定の刺激に応じて放出されるかどうかは、 実際に「放出された伝達物質」を測定しない限り何も言えません。 神経末端の数を知りたいなら、組織を免疫染色するなどの方がいいでしょう。

(無題) 削除/引用 No.152-3 - 2011/03/14 (月) 12:30:13 - neuron オレンジさん 回答ありがとうございます。 HPLCで測定するというのをはじめて知りました。 ありがとうございます。一度可能かどうか検討してみようと思います。 もう１つ伺いたいのですが、ある組織で分泌顆粒の中にある濃度が高い場合、 その後分泌されているであろう放出量も多いと考えることは可能でしょうか？ よろしくお願い致します。

(無題) 削除/引用 No.152-2 - 2011/03/12 (土) 21:26:39 - オレンジ 一般に神経伝達物質は、放出後すみやかに再吸収されたり代謝分解されたりして、細胞外からなくなります。単にすりつぶして上清を取るだけでは、神経末端の分泌顆粒の中に含まれている物質の量がわかるだけでは？ 組織中で分泌される伝達物質量を測定する場合、マイクロダイアリシスを用いて連続的に細胞外液を回収し、HPLC 等で定量するのが定番だと思います。

組織内神経伝達物質の定量 削除/引用 No.152-1 - 2011/03/12 (土) 18:18:44 - neuron いつもお世話になっております。 ひとつ質問させていただきたく参加させていただきました。 組織内での神経から放出されるノルアドレナリンなどの神経伝達物質を定量的に測定したいと考えております。 具体的にはマウスから組織をサンプリングし、その中に含まれる神経伝達物質をELISAを用いて測定しようと考えておりますが、よいサンプル調整の方法はありますのでしょうか？ 現在考えていますのは、組織をホモジェナイズした後に遠心し、上澄みをサンプルに使用しようかと考えております。 経験者の方など教えていただけたら幸いです。 よろしくお願い致します。

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