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臨床検体の保存 トピック削除
No.216-TOPIC - 2011/03/28 (月) 18:35:38 - まち
菌に感染した組織の保存を行った後、リアルタイムPCRでDNA量を測定したいと考えています。
-80℃で保存すれば半年もしくは1年後、DNAを抽出し解析しても影響はないのでしょうか。
感覚では影響はないと思うのですが、
保存温度と期間によりDNA量の影響を検討した文献や参考書が見つかりませんでした。
どなたかご存知でしたら教えてください。
 よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.216-2 - 2011/03/29 (火) 03:18:13 - 310
増幅産物の長さと、解析は相対的(内部コントロールとの比較)か、絶対的(コピー数が分かっている鋳型)のどちらでしょうか?長さは短いほど、解析は相対的な方が保存中におけるDNAの損傷に強いリアルタイムPCRとなります。

昔、-80Cで数ヶ月程度保存した組織で数キロベースのサザンをやったときは、分解されたDNAの量はデータに影響をあたえるほどではなかったです。ただし保管していたフリーザは開閉の回数が少ないものでした。今使っている-80Cは冷蔵庫(縦型)タイプで複数のラボが使用していることもあり、組織はクライオチューブに入れて液体窒素フリーザの気相部分に保管しています。

臨床検体の保存 削除/引用
No.216-1 - 2011/03/28 (月) 18:35:38 - まち
菌に感染した組織の保存を行った後、リアルタイムPCRでDNA量を測定したいと考えています。
-80℃で保存すれば半年もしくは1年後、DNAを抽出し解析しても影響はないのでしょうか。
感覚では影響はないと思うのですが、
保存温度と期間によりDNA量の影響を検討した文献や参考書が見つかりませんでした。
どなたかご存知でしたら教えてください。
 よろしくお願いします。

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