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yeast two hybrid system について トピック削除
No.278-TOPIC - 2011/04/09 (土) 21:32:50 - シャル
現在Yeast two hybrid を用いて実験を行っています。
通常yeast two hybirdではbaitに
baitにcDNAの全長ではなく部分的な配列を組み込んだ
ものを用いて解析することは可能でしょうか?

Full length の配列が5-ABCDEFGHIJKLMNOPQ-3のものがあり
その中からEFGHIJの配列をbaitに導入してスクリーニングを行う
といった感じです。

解析したいタンパク質の特定のドメインに結合するものを解析できれば
と考えています。

ご意見よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.278-4 - 2011/04/14 (木) 18:37:22 - シャル
小言幸兵衛様、おお様
ありがとうございます。
非常に参考になりました。

(無題) 削除/引用
No.278-3 - 2011/04/10 (日) 02:46:59 - おお
ドメインダイセクションはY2Hでもよくやられます。お示しの喩えでは4、5個のアミノ酸のような印象なのですがこれではドメインと言うにはちょっと短か過ぎるという印象がありますが、まあそれでも目的にそっていれば可能な実験かとは思います。

(無題) 削除/引用
No.278-2 - 2011/04/09 (土) 22:30:25 - 小言幸兵衛
two-hybrid法を用いている論文をいくつかご覧になれば分かると思いますが、ごく当たり前に行われる手法です。もちろん全ての場合に有効というわけではありませんが。

yeast two hybrid system について 削除/引用
No.278-1 - 2011/04/09 (土) 21:32:50 - シャル
現在Yeast two hybrid を用いて実験を行っています。
通常yeast two hybirdではbaitに
baitにcDNAの全長ではなく部分的な配列を組み込んだ
ものを用いて解析することは可能でしょうか?

Full length の配列が5-ABCDEFGHIJKLMNOPQ-3のものがあり
その中からEFGHIJの配列をbaitに導入してスクリーニングを行う
といった感じです。

解析したいタンパク質の特定のドメインに結合するものを解析できれば
と考えています。

ご意見よろしくお願いします。

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