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リン脂質のLC分離 トピック削除
No.313-TOPIC - 2011/04/20 (水) 13:23:42 - masa
こんにちは、僕は研究室で酸性リン脂質(ホスファチジン酸)の分離・定量分析のテーマで実験をしています。

今回LC/MSで脂質を分離してMSで分析することを考え、論文を読んだり参考書を探したりしていますが、カラムはどのカラムを使うのが最も分離がよいのでしょうか?移動相の組成もよろしければ教えていただきたいと思います。
初心者で見当違いな質問かもしれませんがよろしくお願いします。
 
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No.313-5 - 2011/05/04 (水) 04:58:08 - Kanata
もう解決してますか?

漠然としているので回答しにくいのですが、
1.何からリン脂質を分離定量分析したいのか。もしも生体試料における脂質の分析を考えているのであれば、MSによる精密測定だけではなくmatrix effectなどの回避が必要です。前処理方法も重要です。

2.測定するリン脂質は決まっているのか、網羅的に行うのか

3. 文献検索からどれぐらいのダイナミックレンジ(定量)が求められるのか

論文を読み、また研究室の仲間とよくディスカッションしてみてください。それでもまだ疑問が解決できない場合はまた質問してください。

(無題) 削除/引用
No.313-4 - 2011/04/21 (木) 09:30:08 - ~
>カラムはどのカラムを使うのが最も分離がよいのでしょうか?
"最もよい"条件というためには評価基準が必要です。
評価基準を定めて、読んだ文献の結果を評価すれば、その中でどの条件が最もよい条件かを決められるでしょう。
分離度や分離係数で評価するためにはもう1成分を定めないと計算できませんし、一斉分析であればより具体的に評価基準を定める必要があるでしょう。


また、同じサンプルで異なる条件での比較を見たいのであれば、論文よりもメーカーにあたったほうがいいかもしれません。
場合によっては条件検討をしてくれるかもしれません。

報告されている条件ではピークが十分に分離していないというのであれば、カラムの長さを長くすれば理論段数が上がるので、分離出来るかもしれません。長いカラムを買わなくても2本直列につなげることで対応できるかもしれません。

それと、TOFが使えるのであれば、LCで分離できていなくても、精密質量で分離出来るかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.313-3 - 2011/04/21 (木) 06:58:25 - おお
漠然過ぎます。。。
論文とか読んでるのであればたぶん解決済み?

(無題) 削除/引用
No.313-2 - 2011/04/20 (水) 20:12:28 - 苦言
初心者との事ですが、まず自分で調べてみる、自力で始めるというのがスタンスではないでしょうか。カラムの事もここでgeneralな質問としてきくよりも脂質の研究室にせっかくいらっしゃるのですから、研究室の先輩に問い合わせする、教授に教えをこうというのがまずする事が先では。

リン脂質のLC分離 削除/引用
No.313-1 - 2011/04/20 (水) 13:23:42 - masa
こんにちは、僕は研究室で酸性リン脂質(ホスファチジン酸)の分離・定量分析のテーマで実験をしています。

今回LC/MSで脂質を分離してMSで分析することを考え、論文を読んだり参考書を探したりしていますが、カラムはどのカラムを使うのが最も分離がよいのでしょうか?移動相の組成もよろしければ教えていただきたいと思います。
初心者で見当違いな質問かもしれませんがよろしくお願いします。

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