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トリチウムの定量 トピック削除
No.473-TOPIC - 2011/06/01 (水) 19:14:14 - estradiol
RIを使用したことのない素人です。
とても基本的な質問で申し訳ないのですが、RI実験というもののイメージがあまりわからないので、お答えいただけると助かります。

細胞にトリチウムを含む基質を加え、一定時間後に放出された[H3]H2Oを定量したいと考えています。

一体どのような手法で定量するのでしょうか?
また、どのような器具が必要でしょうか?

よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.473-5 - 2011/06/03 (金) 13:20:02 - estradiol
さらにもうひとつ質問なのですが、
Aromataseの活性を測定したいと考えています。

そこで論文を検索したところ、基質としては
トリチウムラベルされたandrostenedionが一般的に使用されているようです。
Aromataseの基質にはTestosteroneもあると思うのですが、
なぜandtostenedionを使うのか、理由はあるのでしょうか。
教えていただけると助かります。

(無題) 削除/引用
No.473-4 - 2011/06/03 (金) 13:14:07 - estradiol
ありがとうございます。
ご回答をヒントに調べたところ、
実験の目処が立ちました。

本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.473-3 - 2011/06/01 (水) 20:11:06 - qq
>一体どのような手法で定量するのでしょうか?
3H-基質と3H-水を分離するのが普通だと思います。基質が脂溶性であれば、クロ・メタで振るだけで良いかもしれませんが、親水性の基質だと液クロかなあ?面倒ですね。
>また、どのような器具が必要でしょうか?
RI研究施設とトリチウム実験の経験者が必須です。
それ以外に液体シンチレーションカウンタ、などなどです。
もしかすると、3H-基質の減少を測定する方が楽かもしれません。

トリチウムの定量 削除/引用
No.473-1 - 2011/06/01 (水) 19:14:14 - estradiol
RIを使用したことのない素人です。
とても基本的な質問で申し訳ないのですが、RI実験というもののイメージがあまりわからないので、お答えいただけると助かります。

細胞にトリチウムを含む基質を加え、一定時間後に放出された[H3]H2Oを定量したいと考えています。

一体どのような手法で定量するのでしょうか?
また、どのような器具が必要でしょうか?

よろしくお願い致します。

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