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「ブアン液は免疫染色に向かない」は本当? トピック削除
No.483-TOPIC - 2011/06/04 (土) 21:46:56 - nami
ブアン液は組織浸透性・固定作用が強力なため、
組織観察に有用かと思われます。
しかし、

「タンパク質の変性作用が強いので、
抗体でタンパク質を検出する免疫染色には向かない」

という記述をある方のブログでお見かけしました。

シトコラン酸処理により回復可能だそうですが、
免疫染色にブアン液を使う場合、
必ず回復処理が必要なのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.483-3 - 2011/06/06 (月) 14:31:36 - ぽすどく
 (あいまいな表現ですが)弱い抗原を検出したい場合、ブアンよりもPFAをまず試してみたいということはあるかと思います。他の方も言っている通り、相性の問題もあるでしょうね。PFAがだめで、ブアンなら染まるというケースもなくはないでしょうし。

 別の角度からですが、ブアンで固定すると、ピクリン酸が蛍光を持っているので、蛍光染色のときに青と緑のチャンネルは使いにくくなります。(赤は問題ないです)

(無題) 削除/引用
No.483-2 - 2011/06/06 (月) 08:46:30 - ~
>必ず回復処理が必要なのでしょうか?
回復処理をしないでやっている人もいたので”必ず”ではありません。
貴方の対象とするたんぱく質と抗体の組み合わせ次第でしょう。

「ブアン液は免疫染色に向かない」は本当? 削除/引用
No.483-1 - 2011/06/04 (土) 21:46:56 - nami
ブアン液は組織浸透性・固定作用が強力なため、
組織観察に有用かと思われます。
しかし、

「タンパク質の変性作用が強いので、
抗体でタンパク質を検出する免疫染色には向かない」

という記述をある方のブログでお見かけしました。

シトコラン酸処理により回復可能だそうですが、
免疫染色にブアン液を使う場合、
必ず回復処理が必要なのでしょうか?

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