Bio Technical フォーラム

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心筋細胞の抽出 トピック削除
No.63-TOPIC - 2011/02/23 (水) 15:04:20 - buchi
仔ラットからの心筋細胞抽出を試みています。コラーゲン処理した細胞をパーコール（58.5％と40.5％）をもちいて遠心分離（3500rpm)しようとしていますが、血球成分がチューブ（15ml）にスピンダウンされません。心筋細胞層とされる層（中層）の細胞も線維芽細胞層とされる層（上層）の細胞もいずれも細胞が混在しています。血球成分は中層にあるようです。どなたか、良い対策法がありましたらご教授ください！！
　
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(無題) 削除/引用
No.63-5 - 2011/02/23 (水) 23:17:26 - Buchi
はい。一応single suspension様になっていますので、遠心機のブレーキもかけないようにしています。コラゲナーゼ処理が不十分なのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.63-4 - 2011/02/23 (水) 23:09:06 - ami2
細胞は遠心前はsingle cell suspensionっぽくなってるんでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.63-3 - 2011/02/23 (水) 22:55:38 - buchi
1200gです。室温（25度）、30分の遠心です。

rpm？ 削除/引用
No.63-2 - 2011/02/23 (水) 21:49:26 - ami2
rpmで書いてるけど、、xgにするとどれだけ〜なんでしょうか。
時間、温度はどうでしょうか。
細胞は遠心前はsingle cell suspensionっぽくなってるんでしょうか。

心筋細胞の抽出 削除/引用
No.63-1 - 2011/02/23 (水) 15:04:20 - buchi
仔ラットからの心筋細胞抽出を試みています。コラーゲン処理した細胞をパーコール（58.5％と40.5％）をもちいて遠心分離（3500rpm)しようとしていますが、血球成分がチューブ（15ml）にスピンダウンされません。心筋細胞層とされる層（中層）の細胞も線維芽細胞層とされる層（上層）の細胞もいずれも細胞が混在しています。血球成分は中層にあるようです。どなたか、良い対策法がありましたらご教授ください！！
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