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培養細胞の選択的回収 トピック削除
No.77-TOPIC - 2011/02/26 (土) 19:55:46 - みんみ
はじめまして。現在ESを使って研究をしているものです。ESを分化誘導して成熟させるとほとんどが均一に分化するのですが、一部が変なものに分化してしまいます。いまはこの変なものを調べる必要があるのですが免染ではどうも特定できません。そこで遺伝子をとっていろいろ調べたいのですが、こういう場合どのようにその部分だけを回収したらいいのでしょうか。

以前ペニシリンカップ?なるものがあったと思うのですが、自分もあまりそういったものに詳しくないので、そういう用途で使えそうなものがありましたら品名など教えてください。

ちなみに細胞はvitroでカルチャーディッシュに接着させています。変な細胞は集団で所々に現れ、大きさも1mm弱ぐらいなのでそれなりと回収する術がありそうなのですが・・
 
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(無題) 削除/引用
No.77-3 - 2011/02/27 (日) 14:46:20 - ~
>以前ペニシリンカップ?なるものがあったと思うのですが
ペニシリンカップが使える状況かどうかは別にして、これ自体は出入りの業者さんに言えばカタログを持ってきてくれるでしょうし、ネットで検索してもでてきます。
http://minatomedical.com/pdf/431.pdf

ただ、カップの中に入った細胞は分離できないので、一面に生えているのであれば、分離には使えません。
(濃縮でも構わなければ使えますが)

その変な集団は、継代して薄播きしても性質が維持されたままコロニーを作るのでしょうか?
そうであれば、継代後にペニシリンカップを使うことは可能です。


チップで掻きとるのは、細胞によってはダメージが大きいようです。
トリプシンのかけすぎでダメージを受ける細胞もありますので、どちらがいいとは言えないかもしれませんが

(無題) 削除/引用
No.77-2 - 2011/02/27 (日) 14:09:33 - kinase
1mmほどもあるのであれば、顕微鏡下で200ulチップの先端でその細胞集団の周りごゴシゴシ剥がして、そのまま吸い取り、エッペンに移すことができます。

コロニーピックの場合にこの方法をよく用いております。

培養細胞の選択的回収 削除/引用
No.77-1 - 2011/02/26 (土) 19:55:46 - みんみ
はじめまして。現在ESを使って研究をしているものです。ESを分化誘導して成熟させるとほとんどが均一に分化するのですが、一部が変なものに分化してしまいます。いまはこの変なものを調べる必要があるのですが免染ではどうも特定できません。そこで遺伝子をとっていろいろ調べたいのですが、こういう場合どのようにその部分だけを回収したらいいのでしょうか。

以前ペニシリンカップ?なるものがあったと思うのですが、自分もあまりそういったものに詳しくないので、そういう用途で使えそうなものがありましたら品名など教えてください。

ちなみに細胞はvitroでカルチャーディッシュに接着させています。変な細胞は集団で所々に現れ、大きさも1mm弱ぐらいなのでそれなりと回収する術がありそうなのですが・・

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