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マクロファージの培養 トピック削除
No.931-TOPIC - 2011/09/16 (金) 05:25:12 - ameagari
いつも活発なフォーラムで、本当に参考になります。
ところで、マクロファージの培養について2点質問があります。
マクロファージの培養では過去にも何回か質問されてましたが、それらには述べられていなかったので、教えて頂きたいです。

どちらも、培地のM-CSFについてなのですが、
1。腹腔内の分化済みのマクロファージにはM-CSFは必要でなく、例えば、DMEM-10%FCSでOKなのでしょうか。免疫実験の教科書を見たのですが、どうも必要ないようなのですが、いまいちはっきりしません。
2。骨髄由来のマクロファージを得る際には、最初の1週間くらいは、分化させる為にM-CSFを入れて培養しているのですが、その後も、M-CSFは必要なのかでしょうか。もし、必要ならば、なぜ、腹腔内由来のものは必要でなくて、骨髄由来のものは必要なのでしょうか。

以上について、教えて頂けないでしょうか。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.931-5 - 2011/09/22 (木) 08:04:45 - う
>私が見ていたのは、一つは、Methods in Molecular Biology, vol 290, P91で、もう一つは、Current Protocol in Immunology です・・・が、その後については述べられていません。

それを見ていたから何だとおっしゃるのでしょうか?

ですから、何に使うか案があるのでしょう?
そのような実験をしている論文を参考にすればいいのでは?

私の個人的な見解は、マクロファージの「分化」と「維持」はできない、です。

(無題) 削除/引用
No.931-4 - 2011/09/19 (月) 04:28:42 - あ
得られたマクロファージを何に使うのか不明ですが、細胞を半分に分けて、M-CFS有り無しで培養して比べればいいのではないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.931-3 - 2011/09/17 (土) 08:52:02 - ameagari
早速の返答ありがとうございます。

私が見ていたのは、一つは、Methods in Molecular Biology, vol 290, P91で、もう一つは、Current Protocol in Immunology です。どちらも、腹腔内からと、骨髄由来のものについて書かれていますが、どちらも、腹腔内のものは血清添加基礎培地のみで、骨髄由来のものは最初の1週間ほどに分化誘導の為にM-CSF(あるいはL−細胞培養上清)を加えるように書かれています。が、その後については述べられていません。
今回は、dendritic細胞を得るのが目的ではありませんので、GM-CSFは用いていません。

(無題) 削除/引用
No.931-2 - 2011/09/16 (金) 15:11:18 - う
少なくとも、何かしらのサイトカインを入れないと、
マクロファージの「分化」と「維持」はできません。

「分化」、すなわち単球からマクロファージ
「維持」、すなわち分化したマクロファージの生存維持

どのマクロファージ(機能的に)を分化させたいのか?
それによってM-CSFでなくて、他のサイトカイン(GM-CSFとか)を入れればいいということも。

>免疫実験の教科書を見たのですが、

自分がどのマクロファージを使いたいのか?
それを念頭において、それに関連する「論文」をよんで
その実験方法を参考にすることが最も一般的な勉強かと思われます。

>なぜ、腹腔内由来のものは必要でなくて、骨髄由来のものは必要なのでしょうか。

腹腔内由来のものは必要ないと、どこからきた話でしょうか??

マクロファージの培養 削除/引用
No.931-1 - 2011/09/16 (金) 05:25:12 - ameagari
いつも活発なフォーラムで、本当に参考になります。
ところで、マクロファージの培養について2点質問があります。
マクロファージの培養では過去にも何回か質問されてましたが、それらには述べられていなかったので、教えて頂きたいです。

どちらも、培地のM-CSFについてなのですが、
1。腹腔内の分化済みのマクロファージにはM-CSFは必要でなく、例えば、DMEM-10%FCSでOKなのでしょうか。免疫実験の教科書を見たのですが、どうも必要ないようなのですが、いまいちはっきりしません。
2。骨髄由来のマクロファージを得る際には、最初の1週間くらいは、分化させる為にM-CSFを入れて培養しているのですが、その後も、M-CSFは必要なのかでしょうか。もし、必要ならば、なぜ、腹腔内由来のものは必要でなくて、骨髄由来のものは必要なのでしょうか。

以上について、教えて頂けないでしょうか。
よろしくお願いします。

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