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(無題) 削除/引用 No.10039-5 - 2021/11/19 (金) 00:41:05 - Tracker Photoconversionです。DAPI用のフィルターで長く励起しすぎると起こります。 フォーカス合わせを明視野かDAPI以外のフィルターセットで行い、最後にDAPIを撮像すれば解決すると思います。

(無題) 削除/引用 No.10039-4 - 2021/11/17 (水) 02:38:00 - おお DAPIなしでやってみましたか(2)。

(無題) 削除/引用 No.10039-3 - 2021/11/16 (火) 18:02:04 - １ DAPなしでやってみましたか。

(無題) 削除/引用 No.10039-2 - 2021/11/16 (火) 15:50:46 - AA 顕微鏡のセッティングかどうかは別の顕微鏡でみてみればわかりますね。 例えば蛍光顕微鏡でみて細胞質は光っているんでしょうか。

共焦点顕微鏡で細胞質GFPがDAPIと同じ場所に。。。 削除/引用 No.10039-1 - 2021/11/16 (火) 15:05:23 - LAS X すごく初歩的な質問で申し訳ないですが、教えて欲しいです。 pX458を導入した293T細胞を、固定、膜透過処理後、Cy5-ファロイジンとDAPIで染めています。 観察はLaicaのLAS-Xを使っています。 結果は、GFPが完全にDAPIとマージしています。 FACSでは80％がGFP陽性でした。 調べたら、DAPIのGFP波長へのphoto-conversionが起きることがあるようです。 これが原因でしょうか？ 技官さんは、DAPIのシグナルがGFPのチャンネルに入ってるだけだと思う、と言っていました。 私もそう思いますが、セッティングを一緒に確認したところ、問題なかったです。 どんなコメントも感謝します。よろしくお願いします。 稚拙な内容ですみません。

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