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(無題) 削除/引用 No.10069-6 - 2021/11/26 (金) 13:14:25 - まっちゃ 返信いただいた皆様 多くの回答をありがとうございました。 血清、抗生物質なしのDMEMが残っているのでそれで洗ってみることにします。

(無題) 削除/引用 No.10069-5 - 2021/11/26 (金) 08:58:09 - DX 皆さんおっしゃってる通り無血清培地で洗浄するのがよいでしょう。 無血清培地は別の安価なもので構いません。 カルシウムとマグネシウムが入っていないPBS(-)で洗浄するから剥がれるのです。 PBS(+)の作製は面倒なので無血清培地が楽だし安い。

(無題) 削除/引用 No.10069-4 - 2021/11/25 (木) 22:49:46 - b カルシウムとマグネシウムを含有するPBSもしくはHanks solutionでやってみてください。無血清培地そのもので洗ってもいいです。

(無題) 削除/引用 No.10069-3 - 2021/11/25 (木) 16:08:51 - q 無血清培地で洗浄してみてはどうですか

(無題) 削除/引用 No.10069-2 - 2021/11/25 (木) 13:47:00 - 774 詳しい方、経験者の方、というなら細胞の種類や手順の詳細をかかないと自分が経験者かも分かりませんよ　笑 なので一般論。 「長く」浸かっているというのはどの程度を想定していますか? 通常の洗い(数秒、繰り返しても数分)であればよく接着する細胞であればほとんど剥がれません。 接着が弱い細胞であるならコーティングするとか。 PBSはただの等張でpH調製された塩溶液であって細胞にとっての栄養成分・保護成分は含まないですから数時間以上おいたら栄養枯渇も起こるかも? 培地なら剥がれないというのであれば置換する法の培地(無血清培地)で洗えば良いのでは? ゆっくりといっても液の入れ方の問題もあろうから経験者に見てもらった方が良いと思う。 今の季節だとベンチの天板が冷えているから、ゆっくりし過ぎると冷めますよ。

PBSにつかる時間 削除/引用 No.10069-1 - 2021/11/25 (木) 12:45:39 - まっちゃ 　以前に何回か質問をさせていただいたものです。 　細胞を無血清培地に移行する際に3回PBSで洗浄するのですが、細胞がはがれてしまって困っています。はがれないようにゆっくりPBSを入れてもはがれるので、PBSに長く浸かっていることがよくないのかと考えました。なお、培地との温度差にも影響があるのかと考え、PBSは37℃に温めて使っています。 　PBSに長く浸かっていると細胞に悪影響があることがあるのでしょうか？ 詳しい方、経験者の方、どうぞご教示頂けると幸いです。

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