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未固定凍結切片(心臓)の保存方法について トピック削除
No.1116-TOPIC - 2012/11/07 (水) 09:25:23 - 研究1年目
基礎研究を初めて半年余りの初学者です。
現在、心臓の未固定凍結切片を作製中です。
心臓を脱血後そのままOCTコンパウンドに入れ、-80℃で保存しています。
そこで、質問なのですが、未固定の凍結切片を薄切した場合の
保存方法について御教授いただければと思います。
現在は薄切した後、風乾し10%マイルドホルム5分間で固定し
なるべく早め(可能ならその日のうち)に使用しています。
ただ、その日のうちに出来るものには限界があるため保存
したいのですが、
@保存する際には固定してからの方がいいのか
A保存方法は未固定のままでもいいのか固定後の方がいいのか
 保存温度は4℃か-30℃ or -80℃のいずれか
B保存期間としては未固定、固定後の状態でどのくらい
 もつのか(特に免疫染色の場合、可能であれば組織染色の場合も)
他、何かありましたらお教え願えればと思います。
薄切切片の使用目的は免疫染色、組織染色(H&E、シリウスレッド染色、
マッソントリクローム染色など)です。
よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.1116-3 - 2012/11/09 (金) 11:26:59 - 研究1年目
組織様

ありがとうございます。
未固定のまま保存で大丈夫なんですね。
実際に行ってみようと思います。
また、色々とお教えいただければ幸いです。

(無題) 削除/引用
No.1116-2 - 2012/11/07 (水) 10:20:32 - 組織
>@保存する際には固定してからの方がいいのか
>A保存方法は未固定のままでもいいのか固定後の方がいいのか
> 保存温度は4℃か-30℃ or -80℃のいずれか
>B保存期間としては未固定、固定後の状態でどのくらい
> もつのか(特に免疫染色の場合、可能であれば組織染色の場合も)

固定せずに-80度で保存しています。固定後保存は経験がないのでわかりません。
保存期間は、免疫染色なら2週間くらいまでに決めています。
時間が経つとどうしても染色性は低下するので。
特殊染色については、長期保存しても問題ないでしょう。

未固定凍結切片(心臓)の保存方法について 削除/引用
No.1116-1 - 2012/11/07 (水) 09:25:23 - 研究1年目
基礎研究を初めて半年余りの初学者です。
現在、心臓の未固定凍結切片を作製中です。
心臓を脱血後そのままOCTコンパウンドに入れ、-80℃で保存しています。
そこで、質問なのですが、未固定の凍結切片を薄切した場合の
保存方法について御教授いただければと思います。
現在は薄切した後、風乾し10%マイルドホルム5分間で固定し
なるべく早め(可能ならその日のうち)に使用しています。
ただ、その日のうちに出来るものには限界があるため保存
したいのですが、
@保存する際には固定してからの方がいいのか
A保存方法は未固定のままでもいいのか固定後の方がいいのか
 保存温度は4℃か-30℃ or -80℃のいずれか
B保存期間としては未固定、固定後の状態でどのくらい
 もつのか(特に免疫染色の場合、可能であれば組織染色の場合も)
他、何かありましたらお教え願えればと思います。
薄切切片の使用目的は免疫染色、組織染色(H&E、シリウスレッド染色、
マッソントリクローム染色など)です。
よろしくお願いいたします。

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