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(無題) 削除/引用 No.11442-8 - 2023/05/17 (水) 07:57:10 - Skeptics 横から茶々を入れてすみませんが、トランスフォーメーションした後に一部しか蒔き出さないのであれば、なぜ最初からスケールダウンしないのですか？コンピテントセルの無駄遣いじゃないでしょうか。ライブラリー構築のような効率命の実験ならともかく、普通にプラスミドを作るだけですよね？

(無題) 削除/引用 No.11442-7 - 2023/05/17 (水) 01:46:07 - おお >[Re:6] いつもはさんは書きました : > コンピ製品で900uL > うち撒くのは150uL > コンラージで慣らして > インキュベーターに入れる頃には > 傾けても垂れない程度には乾いてる > ので > 200uLならシャーレを逆さにして置くと > フタ側に少し垂れてくるかもしれない。 > ちゃんと使う前に表面をかわかしておいたら２００ぐらいは大丈夫だけどね。

(無題) 削除/引用 No.11442-6 - 2023/05/17 (水) 01:11:58 - いつもは コンピ製品で900uL うち撒くのは150uL コンラージで慣らして インキュベーターに入れる頃には 傾けても垂れない程度には乾いてる ので 200uLならシャーレを逆さにして置くと フタ側に少し垂れてくるかもしれない。 回復培地入れるにはP1000使って CB内のP200の目盛を動かすのが億劫だから 150でも200でもそのまま使ってもいいくらいの差

(無題) 削除/引用 No.11442-5 - 2023/05/15 (月) 21:19:31 - それは 「200μl に取り分けた液体を使用した」「n=1 の量として200μl 使用した」と言う意味です。 大量のストックから200μl を何回か取って何枚かのプレートに播いたかもしれませんし、200μl を１回だけ使用したかもしれません。それは前後の文脈を見ないとわかりません。 私は200μl が多すぎるとは思いません。若干多いけど。

(無題) 削除/引用 No.11442-4 - 2023/05/14 (日) 06:16:27 - おお 単純に例えば200ulより多くあるチューブから200ulとっても"ariquot" (out)と動詞でつかうし、そうやって取ったものを名詞でan ariquotという。

(無題) 削除/引用 No.11442-3 - 2023/05/14 (日) 06:08:12 - おお >[Re:1] 0513さんは書きました : > あと、単純に200 uLを寒天培地に播くとして、少し多すぎる気はしないでしょうか (なかなか乾かない…)。私はいつも大腸菌の形質転換であれば、液量が多くなりそうなときは回復培養後、遠心を行ない、上清を適量捨て、残った培地で菌体を再懸濁し、だいたい20 ~ 50 uLぐらいを播いています。これは、例えば、酵母のヒートショックによる形質転換でもこのような操作を行っても問題ないでしょうか。 寒天培地は、作ってから表面を乾かすべきです。余計な水分を除けば、200ul ぐらいは乗せれます。 乾かし方は蓋側を上にして室温放置でオーバーナイト、あるいはクリーンベンチとか 風があるところなら数時間。ま、大腸菌ようインキュベーターで数時間でもいいけど抗生物質によっては気が進まないかも。 乾かしていると、表面にシワと言うかひび割れというか、亀の甲羅状のものが見えてくる。そこまでしなくてもいいけど、乾かしてないと、まいてインキュベーターに入れてから水分が表面に滲み出てきてコロニーになるべき菌はその水分中で拡散しながら増えてくるので、コロニーとして拾えなくなる場合もある。

(無題) 削除/引用 No.11442-2 - 2023/05/14 (日) 03:37:26 - c これ、おそらくタイトルと質問の内容(大腸菌の知識)が別の話題になっていますね。 アメリカ８年目です。 Aliquotは、おそらく辞書でも見てもらった通り、（分配された溶液）です。 主に、別のラボから試薬を分けてもらう時に、aliquoteちょうだいみたいな言い方します。 大腸菌の方の知識は全くないので、後半の文章は私にはわかりません。

アリコートの意味とは 削除/引用 No.11442-1 - 2023/05/13 (土) 21:00:40 - 0513 こんにちは。初歩的な質問かもしれませんが、論文中によく出てくるアリコートに意味がイマイチよく分かりません。 辞書的な意味は調べれば分かりますが、例えば、大腸菌のヒートショックによる形質転換のような実験で、「200 uLのアリコートをLB培地に播いた。」と記載されていたら、200 uLは培地に播いて、他の培養液は廃棄しましたと言う意味でしょうか。 あと、単純に200 uLを寒天培地に播くとして、少し多すぎる気はしないでしょうか (なかなか乾かない…)。私はいつも大腸菌の形質転換であれば、液量が多くなりそうなときは回復培養後、遠心を行ない、上清を適量捨て、残った培地で菌体を再懸濁し、だいたい20 ~ 50 uLぐらいを播いています。これは、例えば、酵母のヒートショックによる形質転換でもこのような操作を行っても問題ないでしょうか。

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