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(無題) 削除/引用 No.11564-7 - 2023/06/30 (金) 06:53:54 - おお >[Re:6] ゆさんは書きました : > NaOHで加熱は良くないと思う。ペプチド結合が切れるかもしれないので。 参考にできる文検などありますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11564-6 - 2023/06/28 (水) 16:26:50 - ゆ NaOHで加熱は良くないと思う。ペプチド結合が切れるかもしれないので。ペプチド結合は強酸には（ボイルでもしないかぎり）かなり安定だけど、強アルカリにはわりと脆弱だったりします。

(無題) 削除/引用 No.11564-5 - 2023/06/28 (水) 15:45:42 - ドガ 1N とか廃止された単位を使うのはやめましょう。 SI単位を使うこと。 よほど年配の先生に習ってるのかな。

(無題) 削除/引用 No.11564-4 - 2023/06/28 (水) 13:42:29 - srout タンパク定量したことは無いですが、他の用途でNaOH加えて超音波や加熱するプロトコルは見たことがあります。濃度がその後に影響しないなら2Nとか濃くしたり。

(無題) 削除/引用 No.11564-3 - 2023/06/28 (水) 02:53:41 - あの NaOHにこだわる必要あるのですか？

(無題) 削除/引用 No.11564-2 - 2023/06/28 (水) 02:24:52 - おお そういうのはちょっと経験がないのだけど、、、いや、もしかしたらRI関連でやったことあるかもしれない、、、 とにかく張り付いているものはスクレーパではがすしかないでしょう。デブリになっているものは超音波とか、ビーズを使って激しく攪拌して見た目デブリがないくらいにまでして、遠心するか。 細胞を回収してから（PBS中でスクレーパーではがして細胞懸濁液を作ってから遠心して回収）NaOHでLysisするとかできるならそっちのほうがいいかもしれない。

1N- NaOHによる細胞の可溶化(タンパク定量用) 削除/引用 No.11564-1 - 2023/06/27 (火) 21:48:07 - 大きな木 ヒト凍結肝細胞を培養しております。 そのタンパク定量解析のため，1N‐NaOHで細胞をライセート化しようとしたところ(R.T.☓3Hrs)， 細胞がそもそも十分に剥離しなかったり，剥離しても凝集塊が結構，残存しております。 何か，コツや留意点などございましたら，ご教示いただけませんでしょうか。 宜しくお願い致します。

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