BioTechnicalフォーラム [tween80]

tween80

No.11756-TOPIC - 2023/09/03 (日) 11:07:49 - ほーきんす

ご存知の方がいらっしゃたら教えてください。

とある試薬をマウス実験用に溶解、生成する際に
32.5μLのtween80を入れるよう記載がありました。

tween80が粘稠な液体のためピペットや注射器などで吸うことができず困っています。どうしたらよいでしょうか？
　

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No.11756-9 - 2023/09/04 (月) 07:06:44 - ほーきんす

分かりやすくアドバイスいただきありがとうございました。

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No.11756-8 - 2023/09/03 (日) 18:18:05 - G25

終濃度 5% v/v DMSO, 5% v/v Tween80を意図したレシピのようですね。
ただし、DMSO, Tw80,水の体積は足し算した値より小さくなるので、いずれにしても近似になりますけど。マイクロチューブスケールで正確な調製は困難。
大事なのは正確な値じゃなくて近似だとしても、一連の実験で再現性、一貫性のある調製方法をすると言うことではないでしょうか。

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No.11756-7 - 2023/09/03 (日) 17:34:53 - G25

Tween 80を1:10で希釈したストック溶液を計量しやすいスケールで作っておく。例えば原液1mLとか、密度から計算して1mL相当の質量を秤量するとかして、水を10mL加える。

レシピにあるTween80 32.5 uL+ddH2O 325 uLの部分を、希釈済みTween80 357.5 uLに置き換える。

厳密にはTween80と水では体積は足し算できない(足し算した体積より小さくなる)ので、レシピの正確な再現にはならないけど、誤差の範囲でしょう。そもそもTween80を32.5 uL測らなきゃならないレシピなんて正確性や再現性に配慮しているとは思えない。
いっそ、10% Tween80のストック溶液、325 uLに置き換えてもいいととも思う。
32.5 uLずつのDMSOとTween80に水325 uLというのは、元々は10％ DMSO/10%Tween80を意図したもののようにも思えるのです。

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No.11756-6 - 2023/09/03 (日) 13:15:02 - ほーきんす

ありがとうございます。
精密天秤でやってみようとおもいます。
ちなみにAPI-1という試薬をDMSOで溶解して使用するのですが、
DMSO32.5μl＋PEG260μl＋tween80 32.5μl＋ddH2O 325μl
で作製してマウスに50μlずつ投与するようにと書いてありました。

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No.11756-5 - 2023/09/03 (日) 13:08:06 - LPS

32.5ulならば、比重が１.07としても３0.6mg、精密天秤で測れますね。
最終容量が許すなら、774Rさんが言っているように、最初、希釈液を比重を基に作って、それを添加するのもありですね。

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No.11756-4 - 2023/09/03 (日) 12:44:05 - ほーきんす

先輩から譲り受けたtween80はプラスチックの容器に約200ml粘調な液体として入っています。それを1mLのチューブに32.5μl移したいのですが、それがいま難しい状況です。