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(無題) 削除/引用 No.12755-4 - 2024/12/25 (水) 09:08:34 - 准教授 細胞死の検出は実は意外とファジーです。TUNEL、cleaved caspase 3、annexinV、アクリジンオレンジ、遊離乳酸など、さまざまな検出方法がありますが、どれか一つがポジだったから「死んでいる」と断言する人もいれば複数ポジじゃないとダメと否定する人もいます。また、アポトーシスを誘導する有名な遺伝子を強制発現させて、見た目も明らかに死んでいるのにTUNELが陽性にならないこともよくあります。複数種類の検出方法を試して、どう表現するかを検討するしかないです。

(無題) 削除/引用 No.12755-3 - 2024/12/24 (火) 19:06:19 - あの 細胞が死んだ直後でないとダメとか いつ細胞が死んだかわからないとかの理由で たぶん組織では難しいのでは。

(無題) 削除/引用 No.12755-2 - 2024/12/24 (火) 07:26:05 - おお ＞病気の動物の傷害部位の組織 と言われても、、、病気によってその組織の病理的状態は違うでしょうし、少ないものですかと言われてもなんとも言えませんが、、、 で先行する研究で見られているようであればそれを参考にすると良いかと思いますが、見つからないのでしょうか？ ふわっとした話で組織のアポトーシスはApoptotic bodyができると周辺の細胞に速やかに吸収されるので場合によっては見つけにくいなんて言うことを聞いたことがありますが、まあそんなもんなのかなぐらいでそれぞれの事例でほんとにそうなのかはなんとも言えません。

組織で死細胞を検出したいです。 削除/引用 No.12755-1 - 2024/12/23 (月) 21:58:28 - vbny 病気の動物の傷害部位の組織の切片（凍結）のTUNNEL 染色して死細胞の検出を試みています。（今はアポットーシスもネクローシスもそれ以外もとりあえず死んだ細胞は全部検出したいのでとりあえずはTUNNELで見てます。）普通にやっても全然何も検出できないので、ダメもとでクエン酸buffer(pH3)で煮沸したりproteinase K処理したりしたら陽性細胞が一応検出できるようになりました。ただ陽性細胞の数がものすごく少ないです（全細胞の1%くらい）。いくつかの論文とか見ると組織切片の場合だと培養細胞のケースと比べて陽性細胞はすごく少ないです。これはTUNNEL 法の検出感度の問題でしょうか。それとも組織だと例え激しい傷害を受けた組織でも実際には残ってる死細胞はもともと少ないのでしょうか。

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