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(無題) 削除/引用 No.12937-7 - 2025/04/30 (水) 23:19:33 - うえ washは基本洗浄瓶です。8回くらいまでは増やしたことあるので大きな影響はないかとは思います

(無題) 削除/引用 No.12937-6 - 2025/04/30 (水) 18:47:39 - あの それから濃度スタンダードのウェルにも、少しだけ、血清を入れるという方法もあります。

(無題) 削除/引用 No.12937-5 - 2025/04/30 (水) 17:53:51 - あの Eiaグレードの96ウェルプレートを使用しているのであれば、疑わしいのは、ビオチン標識などしたタンパクの変性ですね。 バッファに界面活性剤を入れると解決することもありますが、いつもうまくいくとは限らないです。

(無題) 削除/引用 No.12937-4 - 2025/04/30 (水) 16:54:04 - qq 抗原コートの可能性もなくはないと思いますが、 ELISAの洗い方はどうしていますか？ washerで洗っているのでしょうか？ 古い話ですが、シンクの壁面でプレートを叩きつけるようにして、（素早く、確実に）廃液するように言われていました。 C8のstripをうまく洗うのが難しいのではないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.12937-3 - 2025/04/30 (水) 13:13:12 - 774R つい最近、抗原をELISA plateに固定し、血清の抗体価を測定する実験を行いましたが、その際、2年前のplateと15年前のplateでほとんど同じ値が出ました。 plateの銘柄はどちらもMaxisorpです。

(無題) 削除/引用 No.12937-2 - 2025/04/30 (水) 09:40:00 - 2 自作のELI SAしてて割とたくさん使ってた頃に、plateを何度か買い直してましたが、同じメーカーの同じ品番でも、変にback groundが高いものや、いい感じで低いもの、抗原や抗体の吸着量が明らかに低いものがたまにありましたので、ロット差はあると思います。うまく行ってるところに使用してるもののロット番号を聞いて同じものを購入すると良いと思います。

ELISA plateの劣化 削除/引用 No.12937-1 - 2025/04/30 (水) 08:07:54 - うえ indirect elisaがうまく行かず、現状でてる論文でもうまく行ってるグループとうまく行ってないグループがあり、違いがわからないのですが、 ELISA well plateの劣化を原因の一つじゃないかと疑っています。 実験開始当時からC8 maxisorpを使っています。なんだかんだ高いし、使いきれないので、購入を渋っています。 期限切れのplateを使ってうまく行かなかった経験等ございましたらお教えいただけると幸いです。 血清を使用していますが、抗原をまいたウェルで、コントロールの方が高い値が出る、 コートしていないウェルで高い値がでるという現状です。 以上からタンパク質も怪しいですがウェルが原因かなと思っています。 ブロッキング剤の検討は自分達でもしていて効果なし、他のグループでもうまく行ったところ行ってないところ検討して大差なし。市販のものを使っているので、そこに差はないと思われます。 二次抗体もまちまちですが、同じものでうまく行っているグループとそうではないグループがあるような感じです。

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