全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.12964-4 - 2025/05/24 (土) 00:46:26 - AAV コメントありがとうございます。経験者に聞いてみたところ、おおさんのおっしゃるように試薬はいらないとのことでした。FBSの濃度も変える必要はない、基本的には入れっぱなしでいいということでした。MOIは気にしろ、と。とりあえずやってみます。

(無題) 削除/引用 No.12964-3 - 2025/05/23 (金) 13:53:58 - おお 大まかに言うとウイルスベクターは自ら感染できるので、感染できない精製したプラスミドを細胞内に運ぶ役割を担っているリポフェクタミンなどは必要有りません。ですが場合によっては感染を助ける試薬を使うことがあり、レンチやレトロではポリブレンなどが使われます。AAVではそれに相当するものは見たことがありませんが、経験のある方の回答を待った方が良いです。レンチは使ってましたが。 原理的には細胞表面に親和性があり、それを利用して感染すると言うことなので通常の培地でも感染は可能のようです。しかし血清濃度が低い方が良いと言う話もあり感染効率が冴えない時は特に下げたりするようです。しかし、これはどんな細胞をどんな条件で実験したいかによって制約を受けることもあります。実験デザインとの兼ね合いで考えるべきかと思います。 AAVはserotype と細胞の相性もあるのでそれを確認したいのか、それとも考えている実験系に置いて感染が可能かなどを見たいのかなどでやり方も違ってくるでしょうから、頼んだ人と実験の打ち合わせをした方が良いと思います。

(無題) 削除/引用 No.12964-2 - 2025/05/23 (金) 07:40:54 - たくみ AAVを293Tなどで作らせ、数日後に293Tの細胞を破壊してAAVを取り出します。

アデノ随伴ウイルスを細胞へ導入する方法 削除/引用 No.12964-1 - 2025/05/23 (金) 02:24:55 - AAV GFPが搭載されているアデノ随伴ウイルスが研究室にあり、これが今使用している細胞に導入されるかどうかをGFPの発現から簡易的に見てほしい、と言われました。培養細胞へのtransduction方法ですが、単にウイルスを培地に入れるだけでいいのでしょうか？（というサイトもあります。）あるいはLipofectamineなどの試薬を入れたほうがいいのか。何時間でwash outしたほうがいい、ずっと入れっぱなしでよい、FBSの濃度は、など、ポイントがありましたら教えていただきたいです。よろしくお願いします。

全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---