全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.12990-5 - 2025/06/08 (日) 02:27:50 - あの 誤字ありました。正しくは、低張液、です。

(無題) 削除/引用 No.12990-4 - 2025/06/08 (日) 02:25:21 - あの 同じ実験をしたことはありませんが、次あたりを思いつきます。 ヘパリンを早めの段階で注射して、灌流液にもヘパリン入れる。 後は、 脳を取り出して、オンアイスで、リシス用の低調液入れたディッシュで、ハサミで乱切り。 次に目視で血管を除去しながら、脳組織中の赤血球をリシスさせる。 最後に別のPBSあたりを入れたディッシュで洗って、保存。

(無題) 削除/引用 No.12990-3 - 2025/06/08 (日) 02:10:24 - おお 因みに免疫組織染色でも色々な理由で灌流し血液を抜いてから組織を取り出す事は多いです。ご存じかも知れませんが。

(無題) 削除/引用 No.12990-2 - 2025/06/08 (日) 01:55:13 - おお Colin M, Moritz S, Schneider H, Capeau J, Coutelle C, Brahimi-Horn MC. Haemoglobin interferes with the ex vivo luciferase luminescence assay: consequence for detection of luciferase reporter gene expression in vivo. Gene Ther. 2000 Aug;7(15):1333-6. doi: 10.1038/sj.gt.3301248. PMID: 10918505. ルミノールのヘムによる化学発光はルシフェラーぜの発光機序的に起こりうるのだろうかと思ってましたが、機序はともかく論文が出てた。ただ今手元の環境ではアブストしか見れないけど。 マウス固体をそのままでルシフェラーぜ活性を測定することもあるので、どの程度影響があるのかとも思いますが。

マウス脳組織のホモジネートでヘモグロビン混入を防ぐ方法 削除/引用 No.12990-1 - 2025/06/07 (土) 22:37:49 - HiroAAA いつも勉強させていただいています。 現在、マウス脳組織をホモジナイズしてタンパク質を抽出し、ルシフェラーゼアッセイに使用しています。 しかし、サンプルごとに赤みが異なり、ヘモグロビンの混入量に差があることが原因ではないかと考えています。 実際にどの程度影響しているのかは判断出来ていませんが、ヘモグロビンの混入は発光に影響を与える可能性があるため、可能な限り除去したいと考えています。 現在、対策として次回の実験で検討している処理は以下のとおりです： ・解剖の際に左心室からPBS(-)灌流による血液除去をしっかり行う ・脳表の血管をできるだけ除去してからホモジナイズする このような問題に対して、他に有効な方法をご存じの方がいらっしゃいましたら、ぜひご教示いただけますと幸いです。 どうぞよろしくお願いいたします。

全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---