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(無題) 削除/引用 No.13156-3 - 2025/11/11 (火) 04:42:23 - おお >NCBIでのCDSは4.2 kb CDSと書かれているので蛋白のアミノ酸配列（１４００アミノ酸長）がコードされてますね。アミノ酸をコードしない調節領域ではないと思われます。 まず情報を精査する必要があると思います。 NCBIの情報はプレディクションなのかどうか、 複数の翻訳開始点が存在する可能性があるか（複数の蛋白がコードされている場合も）、 ゲノムに複数の転写開始、ターミネーターがあるか、 あなたの得られた約1000アミノ酸の情報はどこから得られたのか？ 翻訳後プロセッシングを受けるかどうかなど。 通常その蛋白を発現させて精製するとかであれば、CDSを入れればいいです。 ほんとによくわからなくて、その遺伝子としての機能が知りたいなら、非翻訳領域を含めて発現させる手はあります、その時は翻訳開始点より上流の配列も含みますからタグの設計を工夫する必要があります。

(無題) 削除/引用 No.13156-2 - 2025/11/10 (月) 09:54:05 - う ＞ATGからHisタグ後にstop codonまでをplasmidに入れるのではワークしないでしょうか。 むしろそれが普通じゃないですか？ 恒常的に十分量発現していれば遺伝子丸ごとをプラスミドにいれればいいでしょうけれど、大量発現を誘導したり、遺伝子がどこから始まるかがわからなければORFだけ組み込むのが一般的でしょう。

細菌由来の遺伝子を大腸菌で組換えタンパク質を作りたい 削除/引用 No.13156-1 - 2025/11/09 (日) 13:08:11 - E.coli お世話になります。 件名の通りではあるのですが、ある細菌由来の遺伝子にコードされるタンパク質を大腸菌でHisタグタンパク質として発現させ、精製したいです。 約1000アミノ酸からなるタンパク質なのですが、にも関わらず、NCBIでのCDSは4.2 kbとなっており、調節領域？というのでしょうか、非翻訳領域も含まれて4.2 kbになっているようです。 私はこれまでヒトやマウスの遺伝子しか扱ってきたことがなく、組換えタンパク質の発現に調節領域が必要か経験がありません。 ATGからHisタグ後にstop codonまでをplasmidに入れるのではワークしないでしょうか。 このあたりの見識がなく、ご意見を頂けましたら幸いに存じます。 よろしくお願いいたします。

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