Bio Technical フォーラム

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マウス肺の薄切 トピック削除
No.13212-TOPIC - 2026/02/04 (水) 22:44:57 - なな
最近マウスの肺を使った研究を任されるようになり、マウス肺の凍結切片を免疫染色する必要がでてきました。
膨張固定した肺を、一晩浸漬固定したあと、30パーセントスクロースで置換し、OCTで包埋しています。
クリオスタッドで薄切をするのですが、あっという間に切片が乾燥しまいます。
皆様は、肺のいろんな位置をとりたい時、どう言った手順で取って、どれくらいの早さで免疫染色に取りかかっていますでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.13212-2 - 2026/02/05 (木) 12:48:45 - wedrftgy
通常は切片をガラスに貼り付けた後はすぐに、乾燥させると思うのですが(ていうか乾燥させないと貼り付かないと思います)実験目的の上で何か乾燥させてはいけない理由があるという理解でよろしいですか。


薄切したら、乾燥後はすぐに(切片を作成した当日もしくは数日以内に)免疫染色するのが理想ですが、現実的には難しいことも多いので、−80℃で保存して、1ヶ月以内は染色してます。使用している抗体、抗原分子の性質、組織や保管状況にもよるのであくまで一般論ですが数ヶ月以上保存したものでは免疫染色での抗体との反応性が明らかに低下してくる(しばしば全然染まらなくなる)ことが多いです。

マウス肺の薄切 削除/引用
No.13212-1 - 2026/02/04 (水) 22:44:57 - なな
最近マウスの肺を使った研究を任されるようになり、マウス肺の凍結切片を免疫染色する必要がでてきました。
膨張固定した肺を、一晩浸漬固定したあと、30パーセントスクロースで置換し、OCTで包埋しています。
クリオスタッドで薄切をするのですが、あっという間に切片が乾燥しまいます。
皆様は、肺のいろんな位置をとりたい時、どう言った手順で取って、どれくらいの早さで免疫染色に取りかかっていますでしょうか?

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