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(無題) 削除/引用 No.2077-7 - 2013/06/09 (日) 02:12:29 - おお 全長のcDNAをベクターに組み込んだ時点でリコンビナントDNA(組みかえDNA)になります。 もうひとつはサイトカインmRNAはUTRにmRNAを壊す(不安定化させる)しすエレメントがあるものがおおいのでcoding sequence(CDS)の部分だけ使うほうがいいです。とくにまんまるではつげんさせるとき。

(無題) 削除/引用 No.2077-6 - 2013/06/09 (日) 00:43:47 - ｃDNA qqさんが書かれていることがすべてなのですが。 recombinant DNAとは何のことだと思って質問されていますか？

(無題) 削除/引用 No.2077-5 - 2013/06/09 (日) 00:34:57 - 独り言 全長のcDNAと、recombinant のDNA？？？これらは同じ意味じゃないくてぇ？？？ 全長のcDNAはわかるけど、ここでいうrecombinant DNAというのは、何を指しているの？

(無題) 削除/引用 No.2077-4 - 2013/06/09 (日) 00:31:31 - サイトカイン cDNAさん 説明が不十分ですみません。 疑問点は 1、全長のcDNAだと発現しない場合があるのか？ 2、全長のcDNA及びrecombinant DNAでも発現するのであれば、recombinant DNAを使い利点は何か? の２点です。 これが分からないのは、私自身の勉強不足が原因かもしれませんが、教えていただければ幸いです。

(無題) 削除/引用 No.2077-3 - 2013/06/08 (土) 23:26:25 - qq 「マウスIL3,IL6,SCFのcDNAを挿入したvectorを一過性に遺伝子導入」することを「細胞株にrecombinant のDNAを遺伝子導入し」ともいう。

(無題) 削除/引用 No.2077-2 - 2013/06/08 (土) 23:23:39 - ｃDNA サイトカインさんが計画されている実験ではrecombinant DNAを使わないで発現できるのでしょうか？ 質問が理解出来なくて答えるのは失礼なんだけど、何を疑問に思っているのかちょっと分からないです。

サイトカイン産生細胞株の作製 削除/引用 No.2077-1 - 2013/06/08 (土) 23:15:30 - サイトカイン いつもここで勉強させて頂いています。 現在、マウス骨髄細胞を大量に培養する実験を計画しています。 培養時にサイトカイン(IL3,IL6,SCF)が必要なのですが、精製されたサイトカインを購入して使用すると莫大な金額が必要になるため、サイトカインを産生する細胞株を作製しようと考えています。 参考にしている論文では、２９３T細胞にマウスIL3,IL6,SCFのcDNAを挿入したvectorを一過性に遺伝子導入し、その培養液を10%加えた培養液を骨髄細胞の培養に使用したと記載されています。この文献と同様にcDNAをクローニングし293T細胞にサイトカインを発現させようと計画しています。 しかし、さまざまな試薬会社で売られているサイトカインは全長のcDNAを大腸菌もしくは細胞株にrecombinant のDNAを遺伝子導入し作製していると記載しています。 全長のcDNAでも、サイトカインは産生されると思うのですが、recombinant DNAを用いるのは何か理由があるのでしょうか？ 同じような実験を行った人がいれば、教えて頂けないでしょうか。

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