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(無題) 削除/引用 No.2487-10 - 2013/11/01 (金) 16:28:06 - toshitoshi >[Re:9] HIHさんは書きました : > ヘパリン・EDTA共に使用していません。 何度も有難うございます。 まずその方法でさせて頂きます。 大変勉強になりました。 コメントを下さった方々有難うございました。

(無題) 削除/引用 No.2487-9 - 2013/11/01 (金) 10:25:44 - HIH ヘパリン・EDTA共に使用していません。 また、CBAであれば数10μLで十分測定可能なので3時間ごとに200μLの血液をマウスから採取するのは大変ですし、数十〜100μL程度の血液を回収し、そこから得られるすうじゅうμLの血清で実験を行っています。

(無題) 削除/引用 No.2487-8 - 2013/10/31 (木) 16:03:21 - おお >[Re:6] toshitoshiさんは書きました : > 有難うございます。 > 使用濃度等が調べても分かりませんでしたが、 しめしたものは臨床用の採血管の血液を対象にしたものでしょうから、そう言うものをさがせばどれくらい入っているかわかるはずです。

(無題) 削除/引用 No.2487-7 - 2013/10/31 (木) 15:39:05 - toshitoshi >[Re:5] HIHさんは書きました : > 我々がCBA法で血中サイトカイン濃度を測定した際は 有難うございます。 つまり、その方法はヘパリンなしでされていたのでしょうか。 200λ程度の全血から血清を取る予定ですが、 先生がされている方法で行った場合、血清は十分（100λ程度） 取れますでしょうか。 すみませんが、御指導をお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.2487-6 - 2013/10/31 (木) 15:36:19 - toshitoshi > EDTA血漿をこちらでは推奨しているようです(臨床検査ようだとおもいますけど)。 有難うございます。 使用濃度等が調べても分かりませんでしたが、 ヘパリンなしで難しければEDTAを検討してみようと思います。

(無題) 削除/引用 No.2487-5 - 2013/10/30 (水) 12:26:19 - HIH 我々がCBA法で血中サイトカイン濃度を測定した際は 血液を回収 ↓ (転倒混和やフラッシュはせずに)37℃で1時間静置 ↓ 氷上で20分くらい放置 ↓ 13000rpm20min ↓ 上清回収 ↓ もういちど遠心 ↓ 血清として上清を保存 という感じです。

(無題) 削除/引用 No.2487-4 - 2013/10/29 (火) 20:34:17 - おお http://data.medience.co.jp/compendium/module_detail.cgi?field=15&m_class=03&s_class=0004 EDTA血漿をこちらでは推奨しているようです(臨床検査ようだとおもいますけど)。

(無題) 削除/引用 No.2487-3 - 2013/10/25 (金) 17:57:20 - toshitoshi >[Re:2] 〜さんは書きました : > BDのひとに訊くのが一番いいんじゃないかなぁ、、、。 早速のご投稿ありがとうございます。 BDの方に確認しましたが明確な答えは得られませんでした。 製品としてIFNγがあるので分からないという回答もどうかと思いましたが、、、。 そのため経験のある方に伺っている次第です。 ELISA用でも良いのでIFNγ測定時の血清保存を御教授頂けたら幸いです。

(無題) 削除/引用 No.2487-2 - 2013/10/25 (金) 17:38:01 - 〜 BDのひとに訊くのが一番いいんじゃないかなぁ、、、。

CBAによる測定 削除/引用 No.2487-1 - 2013/10/25 (金) 16:28:23 - toshitoshi 平素より先生方にはお世話になっております。 初心者です。 マウス血清保存についてご相談させてください。 マウス血清中のIFNγ濃度をCBAで測定する予定です。 3時間おきの採血後に凍結保存して、 後日解凍してから測定する予定です。 血清保存についてですが、IFNγにヘパリンが使用できないと伺いました。 以下の方法での保存を考えていますがこれで宜しいでしょうか。 1. 採血後5〜6 回程静かに転倒混和させ室温に静置させ（30 〜 60min）凝固を確認後 3000rpm で 10 〜 15 分間遠心分離（15℃〜室温）。 2. 上清をー20度で保存。 何卒ご指導を宜しくお願い致します。

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