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(無題) 削除/引用 No.2608-6 - 2013/11/30 (土) 09:33:37 - ぽん 直接的な回答ではありませんが、使用している試薬についての知識を改善したい場合は、その試薬のウェブ情報をみるのが第一歩ですよね。 たとえ和光の試薬を使っていても、シグマのウェブをみるぐらいのことはしてもよろしいかと。 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/x114?lang=ja&region=JP これの参考文献や、Peer-reviwed papers

(無題) 削除/引用 No.2608-5 - 2013/11/30 (土) 06:51:22 - おお APさんの疑問にはお答えできませんが、TX-114はミセルにせよそうでないにしろ、LPSと(おそらく疎水相互作用で)くっつくのだと思います。 TX-114は温度おあげると水になじまなくなるので、分離できるのですが、そのときLPSがTX-114のほうにいくので、LPSがぶんりできます。温度をあげる以外にも塩濃度をあげるといった方法でも分離できます。 またLPSだけじゃなく、膜蛋白もTX-114の方にいくので、膜蛋白回収にも使われることがあります。 不思議なのはSDSをつかってプラスミドをとるとき途中のかていでSDSは沈殿するのですが、そういうのではLPSは効率的に除けないようですね。でたーじぇんとの種類も重要なんでしょうね。 ちなみにTX-100は114のような使い方はしませんが、カラムに結合したプラスミドなどをTX-100入りバッファーであらうと、LPSは除けるようです。

(無題) 削除/引用 No.2608-4 - 2013/11/29 (金) 23:45:10 - AP >[Re:2] Winter8さんは書きました : > エンドトキシンとTritonについて、それぞれが具体的にどういう物質か理解していますか。 > > エンドトキシンは糖脂質であり、Tritonは界面活性剤です。 > 糖脂質は水に溶け難いので、凝集体を形成します。 > 界面活性剤はミセルを形成して、凝集体を分散させて脂質を取り込みます。 > そういう説明で足りるんでしょうか？ 曇点（clouding point)や相分離がミソだと思いますが。ミセルは分散するだけで分画とは距離がありますよね。 界面活性剤は奥深い。生物学プロパーの私にはピンとこない事象も多いです。 曇点のこともよくわかりません。良かったら解説してくれまいか。

ありがとうございます 削除/引用 No.2608-3 - 2013/11/29 (金) 20:21:36 - めやも 大変恥ずかしい気持ちでいっぱいです。 生化学の授業では、 あまり触れていない分野でしたので 気づきませんでした。 すこし、自分でも調べてはみます また、皆様のお力をお借りしてしまうかもしれませんが その時はよろしくおねがいします。

(無題) 削除/引用 No.2608-2 - 2013/11/29 (金) 19:43:24 - Winter8 エンドトキシンとTritonについて、それぞれが具体的にどういう物質か理解していますか。 エンドトキシンは糖脂質であり、Tritonは界面活性剤です。 糖脂質は水に溶け難いので、凝集体を形成します。 界面活性剤はミセルを形成して、凝集体を分散させて脂質を取り込みます。 エンドトキシンの具体的な組成やTritonの構造などはご自身で調べてください。 界面活性剤の働きは生化学の基礎ですので、教科書等に詳しく書いてあることと思います。

TritonX-１１４について 削除/引用 No.2608-1 - 2013/11/29 (金) 18:52:12 - めやも 初めて投稿させていただきます。 基本的な質問で大変恐縮なのですが ただいま、タンパク質の精製のため TritonX-１１４を使用してエンドトキシンの除去をしているのですが その、基本的な原理を理解できていないため その原理についてみなさまにご教授していただきたく 投稿させていただきました。 みなさまのお力をお貸しください よろしくお願いいたします。

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