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(無題) 削除/引用 No.3575-4 - 2014/11/25 (火) 17:14:54 - けんた みなさま、分かりやすく教えて頂きありがとうございました。 自分でもさらに理解を深められるように勉強してみます。

(無題) 削除/引用 No.3575-3 - 2014/11/22 (土) 00:29:42 - yyy IPのIがimmuno-だから抗体を使うものをIPと言うのだと思ってましたが。 Affinity-captureという言葉は意味的には正確で正しいのだと思いますが、Pull-downと言う言葉の方がよく使われる印象があります。

(無題) 削除/引用 No.3575-2 - 2014/11/21 (金) 17:35:30 - おお >[Re:1] けんたさんは書きました : > ・Affinity captureは精製タンパクのくっついたビーズをライセートに混ぜてそれと相互作用するタンパクを拾ってウエスタンで検出する そうとも限らないみたいですよ ttp://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S107455211100175X ttp://www.nature.com/nrm/journal/v11/n4/fig_tab/nrm2871_F2.html Affinity capture これをそのまま解釈すると親和性を利用して捕獲(回収)するということですよね。ひらたくそう言う方法なんじゃない。回収してからwesternするか、Masにかけるか、それは使い方次第で、Affinity capture westernというならまあ検出はWBでしょうけど。

タンパク質相互作用の検出手法について 削除/引用 No.3575-1 - 2014/11/21 (金) 16:54:59 - けんた 授業のレポートのためにタンパク質相互作用について調べているのですが、わからない点があるのでお伺いしたいです。 イムノブロットを利用したタンパク相互作用の検出方法にCoIPとAffinity capture-Westernがありますが、この違いがよくわかりません。 ざっくりいうと、 ・CoIPは内在性のタンパク質複合体を片方のタンパクに対する抗体でIPしてウエスタンでもう片方のタンパクを検出する ・Affinity captureは精製タンパクのくっついたビーズをライセートに混ぜてそれと相互作用するタンパクを拾ってウエスタンで検出する という理解をしているのですが、これで正しいでしょうか？ また、過剰発現させたタグ付きタンパクをビーズに結合した抗タグ抗体で落とし、ウエスタンでタグ付きタンパクと相互作用するタンパクを検出する場合、どちらの手法に当たるのでしょうか？ まだ理系の学部生で研究室配属前なので、どなたかご教授頂けるとありがたいです。 よろしくお願いします。

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