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(無題) 削除/引用 No.3642-7 - 2014/12/10 (水) 17:20:01 - mori 組織さん、ありがとうございます。 まずは風乾からのキシレンを試してみようと思います。

(無題) 削除/引用 No.3642-6 - 2014/12/09 (火) 10:27:49 - 組織 切片が厚いので剥がれやすいんでしょうね。 水溶性封入剤よりは、風乾してからのキシレン〜封入剤、が良いと思います。

(無題) 削除/引用 No.3642-5 - 2014/12/09 (火) 10:09:41 - mori KENさん、ご回答ありがとうございます。 凍結包埋はOCTコンパウンドを用いて行っています。 切片は下がメッシュになっているウェルを用いて フリーフローティングで反応させてからスライドに貼り付けているため、 一度乾燥させていました。 水溶性封入剤の使用、または風乾してからのキシレン〜封入剤の使用を 一度試してみたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.3642-4 - 2014/12/09 (火) 02:05:37 - KEN 選択肢３： 脱水せず、風乾して、通常の封入剤という手もありますね。封入前に一度さっとキシレンの中に通すだけで、きれいに封入できると思います。

(無題) 削除/引用 No.3642-3 - 2014/12/09 (火) 02:03:52 - KEN 選択肢１：脱水せず、水溶性封入剤でそのまま、封入。 選択肢２：剥がれないようにする。 薄切は、OTCコンパウンドに包埋して行っていますか？ カウンターステイン前に乾燥させるのはどうしてですか？ 自分は、そのままカウンターステインまで全部やってしまいますが、これが剥がれやすくなっている原因だったりして。。。 ちなみにMASコートを私も使っています。

(無題) 削除/引用 No.3642-2 - 2014/12/08 (月) 18:45:44 - mori 文字化けしてしまいました。 50マイクロメートルの凍結切片、です。

切片がスライドガラスからはがれるのを防止する方法 削除/引用 No.3642-1 - 2014/12/08 (月) 18:43:16 - mori マウスの脳でトレーサー実験を行っています。 灌流固定後の脳で50 µmの凍結切片を作製し、 TMB法で切片を反応後スライドガラスに貼り付け、 一晩乾燥させた後にニュートラルレッドで対比染色を行っているのですが、 対比染色後のエタノール系列による脱水・キシレンによる透徹の所で 切片がスライドからはがれてしまいます。 液から液への移動を慎重に行っていても 結構な数の切片がはがれてしまい、悩んでいます。 スライドガラスは、ゼラチンコートとMASコートを使用しましたが、 どちらも結果は同じでした。 何が原因だと考えられるでしょうか。 また、はがれにくくするようには どうすればよいのでしょうか。 教えていただきたいです。 よろしくお願いします。

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