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解決しました 削除/引用 No.3682-5 - 2014/12/30 (火) 13:24:52 - 実験太郎 なるほど！ 細胞外だと気にした方がよいのですね。よく分かりました。 細胞膜タンパクを調べる予定なので、PBS洗浄処理を行おうと思います。 わかりやすいご回答ありがとうございました！

(無題) 削除/引用 No.3682-4 - 2014/12/27 (土) 14:18:19 - おお 洗う理由はいろいろあるでしょうけど、脳など細かくきっていく間は乾燥や、bladeにくっつくなどプラクティカルな部分もあるのではないかとおもいます。 細胞外のものであれば、洗っている間に落ちている可能性はもちろんあると思いますが、その辺はよくわかりません。 細胞膜、細胞内の蛋白などを対象にしている人はそんなに気にしないと思います。細胞外にあるものであれば、きになるなら得られた組織をいきなりバッファーにいれてhomogenize できるような方法にしてもよいかもしれません。

ありがとうございます 削除/引用 No.3682-3 - 2014/12/19 (金) 16:42:12 - 実験太郎 > 摘出して洗浄って、その脳をとりだしたらまるごと洗うかどうかっていう質問? そうです。丸ごとというよりは軽くぶつ切りにした状態です。 > 何を調べたかわからないですが、心臓だったら心筋の働きをみたいのに中にある赤血球まで回収したらわけのわからんことになるのは想像できると思うけど、、、 心臓など明らかに血が多いところならわかるのですが、脳だとPBSの中でふよふよっとさせたら見た目には血の付着は取れるじゃないですか？ そういう場合だと、洗浄の意味というか、解離することに比べたとき以上の洗浄のメリットがあるのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.3682-2 - 2014/12/19 (金) 16:21:54 - おお 摘出して洗浄って、その脳をとりだしたらまるごと洗うかどうかっていう質問? 何を調べたかわからないですが、心臓だったら心筋の働きをみたいのに中にある赤血球まで回収したらわけのわからんことになるのは想像できると思うけど、、、

臓器のPBS洗浄 削除/引用 No.3682-1 - 2014/12/19 (金) 15:37:47 - 実験太郎 ラットの脳からタンパク質を抽出しようと思います。 プロトコルを確認していたら、摘出→PBS懸濁→遠心というPBS洗浄処理を行っているものと行っていないものがありました。 調べると、落としきれない血や汚れを取るPBS洗浄派とPBS洗浄で解離する可能性があるからしない派で分かれている、といった印象だったのですが、他に何かあるのでしょうか。 また、洗浄するしないで大きく結果に響くのでしょうか。 バカな質問だと思いましたらすみません。 宜しくお願いします。

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