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(無題) 削除/引用 No.3734-4 - 2015/01/13 (火) 08:07:14 - UH おお様 いつもありがとうございます。 お恥ずかしいですが、non-essential aminoacidは最終濃度1%で、追加してしまっておりました。ご紹介いただいた文献は、pubmedが1970年からの掲載であったため、確認できませんでしたが、リンクから以下の論文が引けました。 J Natl Cancer Inst. 1986 Mar;76(3):375-87. Characterization of human neuroblastoma cell lines established before and after therapy. Reynolds CP, Biedler JL, Spengler BA, Reynolds DA, Ross RA, Frenkel EP, Smith RG. こちらにも、腫瘍細胞株の樹立方法が書かれていましたので、参考にさせていただきます。 おっしゃる通り、論文をあたってみます。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.3734-3 - 2015/01/13 (火) 07:40:45 - おお あ、しつれいしましたNon-essential amino acidはF12にはいってますね。

(無題) 削除/引用 No.3734-2 - 2015/01/13 (火) 07:37:36 - おお ttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3456456 Klebe RJ, Ruddle FH. Neuroblastoma: Cell culture analysis of a differentiating stem cell system. J. Cell Biol. 43: 69A, 1969. 古いものが多いですけど過去にestablishした文献はあります。きっとほかにもあるでしょうし探してみたらいいかと思います。 neuroblastの培養に近い培養液を使うといいかもしれません。そうでなくともなるべくならNon-Essential Amino Acidsを加えた方がベターです。 neuronは通常の培養用dishにはくっつきにくいので、poly L lysine やpoly D lysineまたは polyornithineなどをdishにこーとしておくのは手だと思います。培養にアダプトして、通常のdishで飼えそうであればその後コーティングせずに飼うというのもやりかとかと思います。

神経芽腫の組織培養方法を教えて下さい 削除/引用 No.3734-1 - 2015/01/13 (火) 06:35:37 - UH お世話になっております。 TH-MYCNマウスと自前のノックアウトマウスとの交配で得たマウスにできた腫瘍から、腫瘍細胞株を樹立したいと思っています。MEFの採取方法を参考にして細胞を分離し、10％FBS添加DMEM/F12, 1%non-essential Aminoacid, 1%Pen/Strepで10cmディッシュで培養を試みています。現状は、まずディッシュの底に張り付く細胞がなく、やむを得ず、培養液ごと細胞を回収して遠心した後、培養液を交換していますが、結局3回目の培養液交換を考える頃にはほとんど死細胞ばかりになっています。 神経芽腫の腫瘍組織から腫瘍細胞株を樹立する方法を教えていただけないでしょうか。 よろしくお願いします。

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