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(無題) 削除/引用 No.3893-7 - 2015/02/26 (木) 09:44:15 - 名無し 言葉足らずですみません。 凍っている状態から溶かすということです。 コメント見ていたらどうもそういうことはしないようですね。

(無題) 削除/引用 No.3893-6 - 2015/02/26 (木) 08:04:44 - q RT-PCRの前にRNAの高次構造を変性させる目的で65度で前処理しますが、冷凍庫からそのまま65度でインキュベートして溶かしながら変性させるということかな？

(無題) 削除/引用 No.3893-5 - 2015/02/26 (木) 07:46:54 - おお >RNA沈殿を水に溶かすときに65℃ I often do so.

(無題) 削除/引用 No.3893-4 - 2015/02/25 (水) 16:26:48 - AP 「融解」する際に65℃で「溶かす」と書いてあって混乱するんですが、 凍ったRNA溶液の融解ですか？ 65℃で解かすというのは聞いたことはありませんし、必要ないでしょう。 RNA沈殿を水に溶かすときに65℃というのはよく有りますが（特に0.1% SDSを加えて）、こっちのこと？　生物から抽出精製したRNAを沈殿して回収すると、しばしば溶解しにくくなるので、加温するメリットはあります。 他に方も指摘されているように、二価金属イオンが存在すると（どこからもキャリーオーバーがなく、絶対存在しないと確信できることはそうそうないと思いますが）加温でRNAが分解するので、しなくても済むなら加温はさけるべきでしょう。

(無題) 削除/引用 No.3893-3 - 2015/02/25 (水) 16:05:19 - TS エタ沈とかしたあとに水を加えて、溶かすために温めるということですかね。 65℃がより優れているかどうかはわかりませんが、 Trizol系のマニュアルでも55-60℃で10-15分溶解する、と書かれていますね。 たしか溶解をFacilitateさせるために。。。とかだったような。 私は、55℃10分をルーチンにしています。

(無題) 削除/引用 No.3893-2 - 2015/02/25 (水) 15:34:11 - mon Mgが入っていなければ、おそらく問題ないと思います。 不要なアニーリングを壊すためか、RNaseを少しでも働かせないためかな？ 私は氷上で溶かし、分取してから必要に応じて加熱処理します。

RNAの融解 削除/引用 No.3893-1 - 2015/02/25 (水) 15:27:39 - 名無し Total RNAを融解する際に65℃で溶かすというのを聞いたことがありますが、 間違ったやり方なのでしょうか？ 氷上で溶かしていますか？

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