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(無題) 削除/引用 No.3947-7 - 2015/03/26 (木) 11:26:52 - のんの 皆様　様々なアドバイスして頂きありがとうございます。 参考にやってみます。 ちなみにmonさん 固定の前にPBSでWashしてます。

(無題) 削除/引用 No.3947-6 - 2015/03/18 (水) 15:47:36 - おお >[Re:3] のんのさんは書きました : > サンプル作成の日によって、視野のほぼ100％が核移行してしまっている日もあれば、そうでないこともあります。 > > 免染のサンプル作成時にそんな風に見えるだけなんでしょうか？ > たとえば浸透化の時間によって染まり方が違うとか、、、 > > すみません、何せ初心者なもので。。。 それではデーターが再現性良く取れてないということで、細胞周期とかどうこうという問題を意識するのは何か付随する条件の違いなどがない限り早々と考えられます。 細胞のコンディションが整わないのか、染色の具合が毎回違うのかなど探っていかなければいけないとおもいます。

(無題) 削除/引用 No.3947-5 - 2015/03/18 (水) 12:39:06 - mon dishで培養している場合、固定の前に細胞をwashしていますか？ washしないで直接固定液をいれる（細胞を刺激しない）ことで改善するかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.3947-4 - 2015/03/18 (水) 07:00:22 - mon 骨芽細胞は扱ったことはないので参考になるか不明ですが、骨芽細胞はdishで培養しているのでしょうか。 もし、そうなら、蒔いてからの培養時間によるかも？ 細胞の播種時には細胞に各種刺激が入りますので、それが落ち着くまでの時間が短いのかもしれません。 または培地中の増殖因子による刺激が常時入っているのか？

(無題) 削除/引用 No.3947-3 - 2015/03/17 (火) 14:53:13 - のんの サンプル作成の日によって、視野のほぼ100％が核移行してしまっている日もあれば、そうでないこともあります。 免染のサンプル作成時にそんな風に見えるだけなんでしょうか？ たとえば浸透化の時間によって染まり方が違うとか、、、 すみません、何せ初心者なもので。。。

(無題) 削除/引用 No.3947-2 - 2015/03/17 (火) 14:11:20 - おお >[Re:1] のんのさんは書きました : > > ｐ65は、細胞周期に応じて核移行したりするものなのでしょうか？ > どなたか詳しい方、教えてください！ 細胞周期に依存するなら核に移行している細胞とそうでない細胞が混在すると思いますが、実際に得られたデーターはどうでしょうか？

NF-ｋBと細胞周期 削除/引用 No.3947-1 - 2015/03/17 (火) 11:34:43 - のんの 研究初心者です。 現在、マウスの骨芽細胞にTNF-αをふりかけて、NF-ｋB　ｐ65サブユニットの核移行を免疫染色で観察していますが、 何も刺激していない状態ですでにｐ65が核移行しているように見えていて良くわかりません。 ｐ65は、細胞周期に応じて核移行したりするものなのでしょうか？ どなたか詳しい方、教えてください！

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