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(無題) 削除/引用 No.6707-5 - 2018/02/21 (水) 19:07:39 - モルゲッソヨ たとえば未分化のマウスES細胞ではCMVプロモーターは機能しません。 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11897870

(無題) 削除/引用 No.6707-4 - 2018/02/21 (水) 15:37:53 - み 多発性骨髄腫細胞株に関して、transfection効率が悪いのか、蛋白Xが不安定なのか、mCherry蛍光の検出率が悪いのか、CMVプロモーターの発現が異なるのか。 コントロール実験をやれば何が問題なのか判別できますよね。

(無題) 削除/引用 No.6707-3 - 2018/02/21 (水) 09:19:32 - ma- 可能性としてそのたんぱくが安定するためにはほかのたんぱくと結合しなくてはいけないのでは？つまり、X-mCherryは作られているけどすぐに壊されているとか

(無題) 削除/引用 No.6707-2 - 2018/02/19 (月) 23:36:39 - xyz CMVプロモーターは必ずしも万能なプロモーターではありません。 細胞腫によっては別のプロモーターを選ぶ必要があるでしょう。 http://journals.plos.org/plosone/article/figure?id=10.1371/journal.pone.0010611.g001

特定の細胞でプラスミドが発現しない 削除/引用 No.6707-1 - 2018/02/19 (月) 20:39:47 - 発現 お世話になります。 ヒト培養ガン細胞株に CMVプロモーター - ヒトタンパクX-mCherry 　のプラスミドの導入を試みています。 このプラスミドはセレクションマーカーにNeoも持っています。 HEK293Tや、ヒト肺がん細胞株、ヒト乳がん細胞株へエレクトロポレーション法（ネッパジーン）で導入を試みたところ、翌日にはmCherryの蛍光を確認し、Ｇ４１８を使って安定発現株をとることもできました。 同様に、ヒト多発性骨髄腫細胞株（浮遊）2種類でも試みたのですが、なぜかこちらではmCherryの発現を確認することができません。 試しにG418をかけてみたところ、遺伝子導入を行っていないものと比較すると、生き残る細胞はいるようです。 質問です ・特定の細胞で遺伝子が発現しないことはあり得るのでしょうか。 恐れ入りますが、アドバイスいただけますと幸いです。 何卒よろしくお願いします。

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